詳細(xì)介紹
小鼠原代結(jié)膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
小鼠原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠原代結(jié)膜上皮細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含小鼠原代結(jié)膜上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠原代結(jié)膜上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復(fù)蘇小鼠原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查小鼠原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果小鼠原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗小鼠原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若小鼠原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待小鼠原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
CX3CL1 Protein Canine 重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) | 淀粉樣肽前體蛋白抗體(C端) |
FAS凋亡抑制分子2 | GDP甘露糖焦酸化酶B抗體 |
轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶1 | 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 |
酸化環(huán)酸腺苷反應(yīng)元件調(diào)節(jié)蛋白抗體 | FNBP1L蛋白抗體 |
纖維蛋白原γ鏈抗體 | 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1 |
酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體 | Ishikawa人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 Human endomeial carcinoma cells Ishikawa RPMI-1640+10%FBS |
小鼠成纖維細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) | CL-0168Neuro-2a/N2a(小鼠腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
酸化乳腺癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體 | 小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
轉(zhuǎn)化生長因子β調(diào)節(jié)蛋白4抗體 | 恒河猴腎細(xì)胞;MMK3 |
CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CASK Others Human 人 CASK Kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
乙酰A結(jié)合蛋白抗體 | HAVCR1 Others Mouse 小鼠 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
眼睛和頭發(fā)顏色相關(guān)蛋白FUZ抗體 | 小鼠原代結(jié)膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基大鼠淋巴成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
NCI-N87 [N87]人胃癌細(xì)胞 Human | TNFSF13B Protein Human 重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 |
CM-H025人胰腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | H9c2大鼠心肌細(xì)胞(ATCC來源) 人髓母細(xì)胞瘤,D341 Med細(xì)胞 NCI-H226 [H226](人肺癌細(xì)胞) |
1.使用小鼠原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本小鼠原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響小鼠原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。