詳細介紹
小鼠原代結膜成纖維細胞專用培養(yǎng)基
小鼠原代結膜成纖維細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持小鼠原代結膜成纖維細胞最佳的生長狀態(tài)。
本產品中已包含小鼠原代結膜成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用小鼠原代結膜成纖維細胞的培養(yǎng)。
產品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細胞基礎培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代成纖維細胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復蘇小鼠原代結膜成纖維細胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查小鼠原代結膜成纖維細胞培養(yǎng)基密度。
2)細胞傳代:如果小鼠原代結膜成纖維細胞培養(yǎng)基密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗小鼠原代結膜成纖維細胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若小鼠原代結膜成纖維細胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待小鼠原代結膜成纖維細胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用小鼠原代結膜成纖維細胞培養(yǎng)基時應注意無菌操作,避免污染。
2.本產品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本小鼠原代結膜成纖維細胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產品請于保質期內使用,超出保質期,必須放棄使用。
5.本產品只供進一步科研使用,不可應用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響小鼠原代結膜成纖維細胞培養(yǎng)基正常使用。
犬胸腺細胞;cf2Th | 載脂蛋白C3抗體 |
凋亡調節(jié)蛋白δ+γ抗體 | G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1 |
轉化生長因子β4抗體TGF β4 | 轉移生長因子β受體3抗體(TGF-βRⅢ,TGFβRⅢ) |
酸化踝蛋白抗體 | GATA結合蛋白2伴侶蛋白抗體 |
纖維蛋白肽B抗體(血纖肽B) | 腫瘤轉移相關蛋白1抗體 |
酸化細胞信號轉導分子Smad-1抗體 | U14(小鼠子細胞) 5×106cells/瓶×2 HPAC(人胰腺癌細胞) |
小鼠成纖維細胞;φ2 | 人視網(wǎng)膜色素上皮細胞裂解物HRPEpiCL |
酸化認知缺陷突觸相關蛋白SynGAP抗體 | 小膠質細胞培養(yǎng)基MM |
轉化生長因子β調節(jié)蛋白1抗體 | CM-H102表皮角化細胞培養(yǎng)基100mL |
大鼠中腦縫細胞(腦脊)(RNr)(1×106) | CD33 Others Human 人 CD33 / Siglec-3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
脂肪醛脫氫酶抗體 | ADM Others Human 人 ADM / Adrenomedullin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
濾泡型轉運蛋白1/II型慢性淋巴性白血病抗體 | 小鼠原代結膜成纖維細胞專用培養(yǎng)基CFPAC-1 人胰腺癌細胞 |
人細胞HN | CCL14 Protein Human 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 標簽) |
H9c2(2-1) (大鼠心肌細胞) 5×106cells/瓶×2 | 小鼠正常肝細胞;NCTC 1469 [NCTC1469] 小鼠子宮內膜上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |