詳細(xì)介紹
小鼠原代宮頸上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
小鼠原代宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠原代宮頸上皮細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含小鼠原代宮頸上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠原代宮頸上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇小鼠原代宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查小鼠原代宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果小鼠原代宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗小鼠原代宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若小鼠原代宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待小鼠原代宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2) | ?;?span>A脫氫酶中鏈抗體 |
肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Fascin抗體 | 高爾基SNAP受體復(fù)合物1抗體 |
豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍(lán)耳病抗體 | 轉(zhuǎn)錄因子TBX6抗體 |
酸化谷受體2A抗體 | FAM155A蛋白抗體 |
脂肪酸去飽和酶1抗體 | 腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體 |
酸化細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體 | MCAM Others Human 人 CD146 / MCAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
小鼠黑色素瘤瘤株;B16 | 人滑膜細(xì)胞裂解物HSL |
酸化內(nèi)收蛋白a1抗體 | H125 人肺癌細(xì)胞 |
病毒包膜糖蛋白E2抗體 | VERO細(xì)胞衍生株;SVP |
CLEC3B Others Mouse 小鼠 CLEC3B / Teanectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | TCN2 Others Mouse 小鼠 TCN2 / anscobalamin-II 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
中心體蛋白AZI1抗體 | OSM Others Human 人 Oncostatin M / OSM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
F-box蛋白家族FBXO31抗體 | 小鼠原代宮頸上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基Hela, 人細(xì)胞系 |
人母細(xì)胞瘤細(xì)胞;BE(2)-M17 | C6 大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞 |
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-1A3 | P3-X63-Ag8.653細(xì)胞,小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Ana-1(巨噬細(xì)胞) 人正常上皮細(xì)胞;MCF 10A |
1.使用小鼠原代宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本小鼠原代宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響小鼠原代宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。