詳細(xì)介紹
兔原代脂肪細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持兔原代脂肪細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代脂肪細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔原代脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代脂肪細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代脂肪細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復(fù)蘇兔原代脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查兔原代脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果兔原代脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗兔原代脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若兔原代脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待兔原代脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
CD200 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的小鼠抗IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh HURP/DAP5 肝癌上調(diào)蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml | TGM2(human transglutaminase 2C polypeptide) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)谷氨酶2C多肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T |
Anti-Phospho-NMDAR1 (Ser896) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化谷受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | E2 ELISA Kit 大鼠雌二醇Multi-class antibodies規(guī)格: 48T |
Rhesus antibody Rh Phospho-NuMA (Ser395) 0酸化核有絲分裂器NuMA蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-Leptin/FITC 熒光素FITC標(biāo)記瘦素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
TSP-1(Mouse thrombospondin 1) ELISA Kit 小鼠血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | phospho-CSF2RB (Tyr766): 0酸化粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體β抗體 0.1ml |
Anti-Tyrosine Hydroxylase/TYH/TH 酪羥化酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml | CM-H100胎兒表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
BALL-1人B淋巴細(xì)胞急性白血病細(xì)胞 BALL-1 B acute lymphoblastic leukemia cells 90%RPMI1640(內(nèi)含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清 | PC-3細(xì)胞,人前列腺癌細(xì)胞 人腎癌細(xì)胞,Ke-3細(xì)胞 臍帶單核細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
FOXH1: 叉頭蛋白H1抗體 0.2ml | ECV-304(人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 肺成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
Human Tissue factor,IF ELISA Kit 人組織因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | CA9 Others Human 人 CAIX / CA9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C | FGF9 Protein Canine 重組狗 FGF9 / FGF-9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
Anti-HERG/FITC 熒光素標(biāo)記特異性離子通道蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 胎兒真皮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
Rhesus antibody Rh APBB1/Fe65 protein 鐵蛋白Fe65抗體 規(guī)格 0.1ml | 兔原代脂肪細(xì)胞專用培養(yǎng)基NRK-52E(大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 APCDD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
FCGR2B Others Rat 大鼠 CD32b / FCGR2B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | TGFB1 Others Mouse 小鼠 TGF-beta 1 / TGFB1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
CDNF Others Mouse 小鼠 CDNF / ARMETL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | Hep-2, 人喉癌細(xì)胞系 |
1.使用兔原代脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本兔原代脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響兔原代脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。