詳細(xì)介紹
兔原代胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持兔原代胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔原代胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇兔原代胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查兔原代胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果兔原代胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗兔原代胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若兔原代胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待兔原代胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用兔原代胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本兔原代胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響兔原代胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
大鼠尿道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | phospho-GABRG2(Ser366): 0酸化γ基γ2受體抗體 0.1ml |
Alpha1-MG(Human Alpha1-microglobulin) ELISA Kit 人α1微球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | C10orf62: 10號(hào)染色體開放閱讀框62抗體 0.2ml |
IGF-1 R 人胰島素樣生長因子-I受體 0.5mg | ABCG2: 三0酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體 0.1ml |
Caspase-6 (NT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg | FADD (Fas-associated protein with death domain) Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗原 0.5mg |
phospho-ATP citrate lyase (Ser455): 0酸化三0酸腺檸檬酸裂解酶抗體 0.1ml | Anti-Lyn 膜相關(guān)蛋白酪激酶Lyn抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
OX-B(Human Orexin B) ELISA Kit 人食欲素/阿立新B 96T | KIR2DL1 Others Human 人 KIR2DL1 / CD158a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
小鼠腎足細(xì)胞;Mouse podocyte | 兔晶體上皮細(xì)胞永生系;N/N1003A(RLE) |
纖維母細(xì)胞生長因子5抗體 Anti-FGF5 0.1ml | SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T |
phospho-BCAR1 (Tyr751): 0酸化癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體 0.1ml | OVCaR-3 人卵巢癌細(xì)胞 |
HeLa 229細(xì)胞,細(xì)胞 人低分化胃癌細(xì)胞,MKN-45細(xì)胞 鼬肺上皮細(xì)胞;MV-1-Lu | PRL Others Mouse 小鼠 PRL / Prolactin 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
TSFP1/SP1(transcription factor Sp1) SP1轉(zhuǎn)錄生長因子抗原 0.5mg | MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細(xì)胞 人胚腎T細(xì)胞,293T細(xì)胞 P19(畸胎癌細(xì)胞) |
Anti-IL-17RC/IL-17RL/FITC 熒光素標(biāo)記白介素17受體C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 兔原代胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基MCF-7 [MCF7], 人癌細(xì)胞系 |
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7 | 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H157 |
人結(jié)膜細(xì)胞裂解物HConFL | HCCC-9810細(xì)胞,人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞 小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性,NFS-60細(xì)胞 水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7) |