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詳細(xì)介紹
兔原代尾尖成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代尾尖成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持兔原代尾尖成纖維細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代尾尖成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用兔原代尾尖成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇兔原代尾尖成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查兔原代尾尖成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果兔原代尾尖成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗兔原代尾尖成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若兔原代尾尖成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待兔原代尾尖成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用兔原代尾尖成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本兔原代尾尖成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響兔原代尾尖成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
HFF-1(人成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 克雷伯肺炎桿菌 | Rhesus antibody Rh PTRF RNA聚合酶1和轉(zhuǎn)錄釋放因子抗體 規(guī)格 0.2ml |
PAI-1 ELISA Kit 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1 96T | RNF70： 環(huán)指蛋白70抗體 0.2ml |
Anti-GAI3/FITC 熒光素標(biāo)記抑制型G蛋白α3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 8-Mar： 膜相關(guān)環(huán)指蛋白8抗體 0.2ml |
細(xì)胞毒性受體NK-p44抗體 Anti-CD336/NKp44/NCR2 0.1ml | Anti-CXCL9/MIG/CMK/FITC 熒光素標(biāo)記γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Mast Cell Chymase： 肥大細(xì)胞類白酶1抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh kir 6.1/IRK8 ATP敏感離子通道蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
NT-proBNP ELISA KIT 大鼠N端前腦素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | IL25 Protein Mouse 重組小鼠 IL25 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
FD6細(xì)胞，人淋巴細(xì)胞與倉(cāng)鼠肺細(xì)胞雜交細(xì)胞 小鼠畸胎瘤細(xì)胞,P19細(xì)胞 CM-H103胎兒真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | IgG2b Others Mouse 小鼠 IgG2b-Fc 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗人IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml | LDLR Others Human 人 LDLR / LDL Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
ox-LDL： 氧化低密度脂蛋白抗體 0.1ml | IL1RAPL2 Others Human 人 IL1R9 / IL1RAPL2 / IL1 Receptor 9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
MN-c, 小鼠皮質(zhì)元 | MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 |
Anti-CC16/FITC 熒光素標(biāo)記克拉拉細(xì)胞蛋白(Clara細(xì)胞分泌蛋白)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO E6 |
IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml | 兔原代尾尖成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基FZD5 Others Human 人 Frizzled-5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | USP7 Others Human 人 USP7 / HAUSP (aa 208-560) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
Vero細(xì)胞，綠猴腎細(xì)胞 RSC96(大鼠雪旺細(xì)胞) 小鼠肉瘤瘤株;S180 | MGC80-3(MGC-803)人胃癌細(xì)胞 |
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