詳細(xì)介紹
兔原代乳腺上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持兔原代乳腺上皮細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代乳腺上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔原代乳腺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇兔原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查兔原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果兔原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗兔原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若兔原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待兔原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用兔原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本兔原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響兔原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
IGSF8 Others Human 人 PGRL / IGSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的小鼠抗IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh ICOS-L/B7-H2/CD275 誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子配體CD275抗體 規(guī)格 0.1ml | CEA/CD66(Human carcinoembryonic antign) ELISA Kit 人癌胚抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T |
Anti-Notch3/FITC 熒光素標(biāo)記跨膜受體蛋白Notch-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | ET-1 ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮素1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T |
Rhesus antibody Rh Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1361) 0酸化胰島素受體β抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-Lck/p56-LCK/FITC 熒光素標(biāo)記淋巴細(xì)胞特異性蛋白酪激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
MTL(Mouse Motilin) ELISA Kit 小鼠胃動素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | CACNG3: 元電壓門控鈣通道γ3/L-type Ca++CP γ3抗體 0.2ml |
Anti-Tubulin-alpha 微管蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml | CM-H068人膀胱上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
CEM細(xì)胞,白血病細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞,PC-3M細(xì)胞 人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞總RNAHIBEpiC NA | TT細(xì)胞,人骨髓樣甲狀腺癌細(xì)胞 人腎小球系膜細(xì)胞,HMC細(xì)胞 小膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
FPR1: 基肽受體1抗體 0.1ml | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/India/NIV33487/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Human lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | FCGR3A Others Human 人 CD16a / FCGR3A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人正常前列腺上皮細(xì)胞;RWPE-1 | 人十二脂腸腺癌;HuTu-80 |
Anti-HDAC9/FITC 熒光素標(biāo)記組蛋白去乙酰化酶9抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | CL-0227T-24(人膀胱癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
Rhesus antibody Rh API5 凋亡抑制因子5抗體 規(guī)格 0.1ml | 兔原代乳腺上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基HDBEC-c 人類皮膚血內(nèi)皮細(xì)胞(HDBEC)來自少年者 500,000cells 肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
CD27 Others Human 人 CD27 / TNFRSF7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CLEC3B Others Mouse 小鼠 CLEC3B / Teanectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;PUMC-HUVEC-T1 人膀胱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293 001A |