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詳細(xì)介紹
兔原代卵巢顆粒細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持兔原代卵巢顆粒細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代卵巢顆粒細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于兔原代卵巢顆粒細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代卵巢顆粒細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇兔原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查兔原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果兔原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗兔原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若兔原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待兔原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
大鼠腎管狀上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | Glutamate receptor 3： 谷酸受體3抗體 0.1ml |
PG-C(Human Pepsinogen C) ELISA Kit 人原CMulti-class antibodies規(guī)格： 48T | C1orf124： 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框124抗體 0.2ml |
IRS P53 (Insulin receptor substrate P53)(多肽) 0.5mg | phospho-alpha B Crystallin (Ser59)： 0酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體 0.1ml |
PP-1 蛋酸酯酶-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | GABRA1(gamma-aminobutyric acid (GABA) A receptor, alpha 1) γ1基A型受體α1抗原 0.5mg |
ARNT2： 芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白2抗體 0.2ml | Anti-LRIG1 LRIG1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
PACAP(Human pituitary adenylate cyclase activating polypeptide) ELISA Kit 人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽 96T | SHPK Others Human 人 CARKL / SHPK 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
星形細(xì)胞生長(zhǎng)添加物SteCGS | COLO 320DM(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
上皮特異性抗原抗體 Anti-ESA 0.1ml | Hep G2 人肝癌細(xì)胞 |
Bone sialoprotein： 骨涎蛋白抗體 0.1ml | 大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
L929-EGFP-puro小鼠成纖維細(xì)胞 L929-EGFP-puro mouse fibroblast cells MEM(NaHCO3 1.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)+10%FBS+8ug/ml puromycin | EDNRB Others Human 人 EDNRB / Endothelin B Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
MAP-2(microtubule associated protein 2) 微管相關(guān)蛋白2抗原 0.5mg | H4細(xì)胞，人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 人大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,HASMC細(xì)胞 正常大鼠腎細(xì)胞(EGF受體陽(yáng)性);NRK49F |
Anti-IL-11/FITC 熒光素標(biāo)記白介素11抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 兔原代卵巢顆粒細(xì)胞專用培養(yǎng)基人淋巴成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
牦牛皮膚細(xì)胞;BMU-S1 | HA(人羊膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
人間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓總RNAHMSC-bm NA | CaEs-17, 人食管癌細(xì)胞株 癌細(xì)胞,SHZ-88細(xì)胞 SJCRH30 [RC13; RMS 13; SJRH30](人骨髓橫紋肌肉癌細(xì)胞) |
1.使用兔原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本兔原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響兔原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
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