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詳細(xì)介紹
兔原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基
兔原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持兔原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于兔原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱(chēng) | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇兔原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查兔原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果兔原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗兔原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若兔原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待兔原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi)；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用兔原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本兔原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響兔原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
Vero非洲綠猴腎細(xì)胞 Vero the African green monkey kidney cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | Rhesus antibody Rh ABCB6 ATP結(jié)合蛋白家族6抗體 規(guī)格 0.1ml |
C21orf128： 21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框128抗體 0.2ml | Anti-HNF1/LFB1/HNF1A 肝細(xì)胞核因子1α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
phospho-HRH1(Ser398)： 0酸化組胺受體H1抗體 0.1ml | Anti-ARIP2B/FITC 熒光素標(biāo)記激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
SPECC1L： 細(xì)胞質(zhì)和紡錘體機(jī)化蛋白A抗體 0.2ml | large S protein： 人Large S蛋白抗體 0.1ml |
Anti-CD170/Siglec-5/FITC 熒光素標(biāo)記唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | AMA ELISA Kit 大鼠抗心肌抗體 96T |
NLRP7： 富含亮酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 0.2ml | 人星形膠質(zhì)細(xì)胞HA |
BB7.2細(xì)胞， 分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞 大鼠肉瘤細(xì)胞,WK256細(xì)胞 人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞裂解物HUASMCL | SF126(人腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤) |
Anti-PENK/Enkephalin A/FITC 熒光素標(biāo)記腦啡肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | SW 1353(人骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CBRH-7919(大鼠肝癌細(xì)胞) |
Anti-ROS/c ros 活性氧簇ROS抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | CDH6 Others Human 人 CDH6 / KCAD 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1 | SUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系) 5×106cells/瓶×2 |
Integrin Alpha 3 + Beta 1： 整合素α3β1抗體 0.2ml | BRL-3A(大鼠正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
Rhesus antibody Rh sIgA/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格 0.1ml | 兔原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(HPAEC) ( 5×105 ) rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞 Rattus |
Hce-8693細(xì)胞，人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化) 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤,Rb細(xì)胞 人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞;Daudi | EGFR Others Mouse 小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
AXR2 Others Mouse 小鼠 AXR2 / CMG2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | T-108B膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL |
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