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詳細(xì)介紹
兔原代呼吸道上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代呼吸道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持兔原代呼吸道上皮細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代呼吸道上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于兔原代呼吸道上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇兔原代呼吸道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查兔原代呼吸道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果兔原代呼吸道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗兔原代呼吸道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若兔原代呼吸道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待兔原代呼吸道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
CXCL3 Protein Human 重組人 CXCL3 / GRO gamma 蛋白 (His 標(biāo)簽) | Anti-Phospho-MYPT1 (Thr696) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化肌球蛋酸酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
anti-OCLN/Occludin 緊密連接蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | TrxR(Human thioredoxin reductase) ELISA Kit 人硫氧還蛋白還原酶 96T |
Rhesus antibody Rh BRN3A 轉(zhuǎn)錄因子Brn3蛋白抗體Brn3α 規(guī)格 0.1ml | IL-33 ELISA Kit 大鼠白細(xì)胞介素33 96T |
EEF1D： 延伸因子EF-1δ抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh CCBE1 膠原蛋白和鈣結(jié)合表皮生長(zhǎng)因子結(jié)構(gòu)域1抗體 規(guī)格 0.2ml |
HBsAg 乙型肝炎表面抗原 96T | PABPC4L： 聚腺苷酸養(yǎng)結(jié)合蛋白4抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GGPS1 法尼基二0酸合酶1抗體 規(guī)格 0.2ml | NCI-H929-CMV-EGFP(穩(wěn)定株)人骨髓瘤細(xì)胞 NCI-H929-CMV-EGFP (stable sain) human myeloma cell 1640+20% FBS(熱滅活) |
色標(biāo)法檢測(cè)試劑盒NO | CL-0071CT26.WT(小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser404) 0酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | 上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加物EpiCGS |
SP-A(Human Surfactant Protein A) ELISA Kit 人表面活性蛋白A 96T | MS751 人子宮頸表皮癌細(xì)胞 |
MDA-MB-436(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 L929(成纖維細(xì)胞) | RSPO3 Others Human 人 RSPO3 / R-spondin 3 (aa 1-146) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
Rhesus antibody Rh CENPA 著絲粒蛋白A 規(guī)格 0.1ml | RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類呼吸道合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
Anti-Phospho-PSD93 (Tyr340) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化突觸后密度蛋白93抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 兔原代呼吸道上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12] |
CSF2 Protein Human 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) | EL4 小鼠淋巴瘤細(xì)胞 |
HEPG2.2.15 肝癌細(xì)胞HBV病毒株 | 小鼠腦瘤細(xì)胞;BC3H1 小鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
1.使用兔原代呼吸道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本兔原代呼吸道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響兔原代呼吸道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
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