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兔原代海綿體內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基?細(xì)胞
兔原代海綿體內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持兔原代海綿體內(nèi)皮細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代海綿體內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于兔原代海綿體內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇兔原代海綿體內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查兔原代海綿體內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果兔原代海綿體內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗兔原代海綿體內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若兔原代海綿體內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待兔原代海綿體內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
軟骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | GLP-2： 胰高血糖素樣肽-2抗體 0.1ml |
MMP-5(Human matrix metalloproteinase 5) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶5Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | C1orf141： 1號(hào)染色體開放閱讀框141抗體 0.2ml |
MAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原) 0.5mg | phospho-Androgen Receptor (Tyr363)： 0酸化雄激素受體抗體 0.1ml |
CPT1A peptide 肉毒堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移酶1A多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | CXCR3/CD183 peptide 細(xì)胞表面趨化因子受體3抗原 0.5mg |
ANGPTL6： 血管生成素相關(guān)蛋白6抗體 0.2ml | Anti-EDG4/LPA2 溶血0脂酸受體蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
NF(Human neurofilament protein) ELISA Kit 人絲蛋白 96T | EPHA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphA4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
胰島β細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | LEP Protein Human 重組人 Leptin 蛋白 |
雌激素受體 Anti-ER 0.1ml | 人羊膜細(xì)胞;WISH |
phospho-Bcl-xL (Ser62)： 0酸化Bcl-xL(Ser62)抗體 0.1ml | 人成骨細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
HEK-293細(xì)胞，Ad5DNA轉(zhuǎn)化的胚腎細(xì)胞 恒河猴胚腎細(xì)胞,FRhK-4細(xì)胞 CL-0251MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 小鼠淋巴纖維細(xì)胞(MLF)(5×105) |
TFF3 (trefoil factor3) 三葉肽因子3(多肽) 0.5mg | CHO-K1-EGFP(CMV-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株 CHO-K1-EGFP (CMV-EGFP leiviral consuct stable sain) hamster ovary cell subline F-12K+10% Hyclone FBS |
Anti-IL-7/FITC 熒光素標(biāo)記白介素7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 兔原代海綿體內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基大鼠子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;C3H 10T1/2 2A6 | VERO細(xì)胞衍生株;SVP |
人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞總RNAHA-sp NA | M4e細(xì)胞，人喉癌細(xì)胞 人腦膠質(zhì)細(xì)胞株(正常),HEB細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A |
1.使用兔原代海綿體內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本兔原代海綿體內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響兔原代海綿體內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
兔原代海綿體內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
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