詳細(xì)介紹
兔原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持兔原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復(fù)蘇兔原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查兔原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果兔原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗兔原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若兔原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待兔原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用兔原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本兔原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響兔原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
CL-0046C4-2(人前列腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | Rhesus antibody Rh ABHD14B 水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白14B抗體 規(guī)格 0.2ml |
Calcineurin B: 鈣調(diào)0酸酶B亞基B1抗體 0.1ml | Anti-KT3 tag KT3 tag抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml |
HOMER3: HOMER3蛋白抗體 0.2ml | Anti-AQP9/FITC 熒光素標(biāo)記水通道蛋白-9抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
SPO11: 減數(shù)分裂重組蛋白SPO11抗體 0.2ml | HRG1: 調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.1ml |
Anti-CD158D/KIR2DL4/G9P/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體2DL4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | CAM(Human calmodulin) ELISA Kit 人鈣調(diào)素 96T |
Phospho-NuMA (Ser395): 0酸化核有絲分裂器NuMA蛋白抗體 0.1ml | 支氣管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
家貓肺細(xì)胞;FCA-L2 肝細(xì)胞,QSG-7701細(xì)胞 BC3H1細(xì)胞,小鼠腦瘤細(xì)胞 | HMEpC Pellet 人類上皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人髓核細(xì)胞cDNAHNPC cDNA |
Anti-PDK1/PDPK1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠30酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | JeKo-1(人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Anti-RGS5 G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | WISH(人羊膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T3 |
IFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) | A549, 人肺癌細(xì)胞系 |
IGF 1: 胰島素樣生長因子1抗體 0.1ml | TGFB1 Protein Human 重組人 / 恒河猴 / 狗 TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 |
Rhesus antibody Rh IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG 規(guī)格 0.1ml | 兔原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基HUVEC-c pooled 混合來源的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC) 500,000cells 腸粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
QGY-7703細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞 人羊膜細(xì)胞,WISH細(xì)胞 大鼠骨肉瘤細(xì)胞;UMR-106 | IFNA13 Others Mouse 小鼠 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
CD3D & CD3E Others Human 人 CD3D & CD3E Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL2 |