詳細(xì)介紹
人原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基
人原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代間質(zhì)細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復(fù)蘇人原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查人原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果人原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗人原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若人原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待人原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用人原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本人原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響人原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
HKC(人胚腎上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 | Rhesus antibody Rh RAB9 ras癌基因家族Rab9蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml |
CLA(Human Collagen autoantibody) ELISA Kit 人抗膠原蛋白抗體 96T | RAD54B: DNA修復(fù)和重組蛋白RAD54B抗體 0.2ml |
Anti-FOXM1/HFH 11/FITC 熒光素標(biāo)記插頭蛋白M1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | MAP3K8: 原活化蛋白激酶激酶8抗體 0.2ml |
淋巴細(xì)胞趨化因子CCL21抗體 Anti-CCL21/6Ckine 0.1ml | Anti-CRP/Biotin 化C-反應(yīng)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
Myosin-XVIIIb: 肌球蛋白XVIIIb抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh KLHL36/C16orf44 Kelch樣蛋白36抗體 規(guī)格 0.2ml |
GSK ELISA Kit 大鼠糖原合成酶激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | 人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204 |
CM-H010人小氣道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | IgG Others Human 人 IgG1 Fc CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗馬IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml | PDPN Others Human 人 PDPN / Podoplanin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
ODZ1: 固生蛋白M抗體 0.2ml | BMPR2 Others Human 人 BMPR-II 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
GBC-SD, 人膽囊癌細(xì)胞 | FGF14 Protein Canine 重組狗 FGF14 / SCA27 蛋白 |
Anti-Phospho-Caspase-9 (Pry153) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞RA |
Rabbit Anti-IgG/AP 堿性0酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml | 人原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基CTLL-2(小鼠T細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人結(jié)膜成纖維細(xì)胞HConF |
A2(人腺樣囊性癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16 | MAG Others Human 人 MAG / GMA / Siglec-4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
RLE-6TN細(xì)胞,大鼠肺上皮Ⅱ型細(xì)胞 PC-3(人前列腺癌細(xì)胞) 大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A | 倉鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11 |