詳細介紹
人原代胰腺導管上皮細胞專用培養(yǎng)基
人原代胰腺導管上皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人原代胰腺導管上皮細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代胰腺導管上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人原代胰腺導管上皮細胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細胞基礎培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復蘇人原代胰腺導管上皮細胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查人原代胰腺導管上皮細胞培養(yǎng)基密度。
2)細胞傳代:如果人原代胰腺導管上皮細胞培養(yǎng)基密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗人原代胰腺導管上皮細胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若人原代胰腺導管上皮細胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待人原代胰腺導管上皮細胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
人喉癌上皮細胞;Hep-2 大鼠食管平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | Rhesus antibody Rh Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗親和素 規(guī)格 0.1ml |
TF ELISA Kit 大鼠組織因子 96T | ROR beta: 維相關孤兒受體β抗體 0.2ml |
Anti-FOXO4/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | MTSS1: 轉(zhuǎn)移抑制蛋白1 0.1ml |
轉(zhuǎn)移生長因子–α抗體 Anti-TGF-α 0.1ml | Anti-Cripto-1/FITC 熒光素標記表皮生長因子相關肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
Mycobacterium bovis: 結(jié)核桿菌菌體蛋白抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLK10 10抗體 規(guī)格 0.1ml |
Hcy ELISA Kit 大鼠同型半胱Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | IL13 Protein Mouse 重組小鼠 IL13 / ALRH 蛋白 |
293XL-hTLR9人胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line 293XL-hTLR9 DMEM+10% Hyclone 滅活血清+10 μg/ml Blasticidin | ACVR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR2B / ACIIB 人細胞裂解液 (陽性對照) |
IgG/FITC 熒光素標記兔抗羊IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml | SEMA5A Others Human 人 SEMA5A / SemaF / Semaphorin-5A 人細胞裂解液 (陽性對照) |
OTX1 + OTX2: 轉(zhuǎn)錄因子OTX1+OTX2抗體 0.2ml | 人臍帶動脈平滑肌細胞 (HUASMC)( 5×105 ) A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株 Human |
EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細胞;B95-8 | CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 |
Anti-CASP4/FITC 熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-2H3 |
IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml | 人原代胰腺導管上皮細胞專用培養(yǎng)基ICOS Others Human 人 ICOS / AILIM / CD278 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SELL Others Mouse 小鼠 SELL / CD62L / L-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照) | PRAP1 Others Human 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細胞裂解液 (陽性對照) |
雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6 小鼠脈絡膜血管細胞培養(yǎng)基 100mL | 成骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
1.使用人原代胰腺導管上皮細胞培養(yǎng)基時應注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本人原代胰腺導管上皮細胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進一步科研使用,不可應用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響人原代胰腺導管上皮細胞培養(yǎng)基正常使用。