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詳細(xì)介紹
人原代牙髓成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基
人原代牙髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持人原代牙髓成纖維細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代牙髓成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用人原代牙髓成纖維細(xì)胞胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇人原代牙髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查人原代牙髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果人原代牙髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗人原代牙髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若人原代牙髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待人原代牙髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用人原代牙髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本人原代牙髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響人原代牙髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
小鼠淋巴細(xì)胞白血病;L1210 | Guanylyl Cyclase alpha 1： 鳥苷酸環(huán)化酶α1/GCS-α-1抗體 0.1ml |
MPO(Human myeloperoxidase) ELISA Kit 人髓過氧化物酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | C1orf194： 1號(hào)染色體開放閱讀框194抗體 0.2ml |
Ang I/AT1(Angiotensin I) 血管緊張素I抗原 0.5mg | ATG9A： 自噬相關(guān)蛋白9A抗體 0.2ml |
RAR-Alpha (Retinoic acid -R-Alpha) 維受體-α 多肽Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | UTS2R/GPR14(Urotensin II receptor：G Protein Coupled Receptor 14) G蛋白偶聯(lián)受體14抗原 0.5mg |
AKAP associated Sperm Protein： 相關(guān)蛋白AKAP抗體 0.2ml | Anti-Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) 0酸化單絲蛋白激酶1/2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
OLAb ELISA Kit 大鼠氧化低密度脂蛋白抗體 96T | SCLY Others Human 人 SCLY / Selenocysteine Lyase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
長(zhǎng)尾綠猴腎細(xì)胞;4647 | G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
蓬亂蛋白1抗體 Anti-DVL1 0.2ml | 大鼠胰腺星狀細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
BTBD10： BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體 0.2ml | HEL(懸浮) 紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞 小鼠肝癌細(xì)胞，HEPA1-6細(xì)胞 FO(骨髓瘤細(xì)胞) | FCRL1 Others Mouse 小鼠 FCRL1 / FCRH1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
TRAF3/CD40bp (CD40 binding protein) 壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗原 0.5mg | QBC-939, 人膽管癌細(xì)胞 腎癌(瘤株),Ke-3細(xì)胞 HL-60(急性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞) |
Anti-phospho-IKK gamma (Ser85) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化核因子κB激酶gamma抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 人原代牙髓成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
NCI-H520 肺鱗癌 | PC-12(高分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化) |
人黑色素瘤細(xì)胞;A875 | 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK 結(jié)腸腺癌細(xì)胞，COLO-320細(xì)胞 ST細(xì)胞，豬細(xì)胞系(ST) |
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