詳細(xì)介紹
豬原代支氣管上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
豬原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持豬原代支氣管上皮細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含豬原代支氣管上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于豬原代支氣管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇豬原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查豬原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果豬原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗豬原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若豬原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待豬原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
ZA1細(xì)胞,轉(zhuǎn)S9基因倉鼠卵巢細(xì)胞 PC-12未分化(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤) 中國倉鼠肺細(xì)胞;R 1610 [R1610] | 細(xì)胞角膜蛋白多糖抗體 |
蛋白酶激活受體-1抗體 | SCN2A抗體 |
細(xì)胞質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白1抗體 | 異質(zhì)核糖核蛋白K抗體 |
伸長因子結(jié)合蛋白抗體 | 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗體 |
跨膜結(jié)構(gòu)域邊緣蛋白CEE抗體 | 損傷誘導(dǎo)蛋白1抗體 |
FBXL11蛋白抗體 | 星形細(xì)胞培養(yǎng)基SteCM-prf |
A10細(xì)胞,大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞 CCL13張氏肝細(xì)胞正常,Chang liver細(xì)胞 CL-0080WB-F344(大鼠肝上皮樣干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | NHDF adult Pellet 正常人皮膚成纖維細(xì)胞團(tuán)塊(捐獻(xiàn)者) > 1 mio.cells CCCSCK |
1號(hào)染色體開放閱讀框104抗體 | 人小腦顆粒細(xì)胞 (HCGC)( 5×105 ) 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs) EC109,人食管癌細(xì)胞 |
轉(zhuǎn)錄因子GATA3結(jié)合蛋白G3B抗體 | SEMA4D Others Mouse 小鼠 Semaphorin-4D / SEMA4D / CD100 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
EAC 小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞 | 恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2 |
顱面部發(fā)育蛋白1抗體 | 人胚肺成纖維細(xì)胞;HFL-I |
胎盤蛋白14抗體 | 豬原代支氣管上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基HPAEC-c 人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(HPAEC) 500,000cells 顱蓋造骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
LAN-5細(xì)胞,母細(xì)胞瘤細(xì)胞 人胎盤絨毛癌細(xì)胞,JAR細(xì)胞 人表皮角質(zhì)細(xì)胞RNAHEK miRNA5 μg | TMEM27 Others Human 人 TMEM27 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
IL12B Others Mouse 小鼠 IL12B / IL-12B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | CM-M007小鼠支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
1.使用豬原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本豬原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響豬原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。