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詳細(xì)介紹
羊原代乳腺上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
羊原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持羊原代乳腺上皮細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含羊原代乳腺上皮細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于羊原代乳腺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇羊原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查羊原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果羊原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗羊原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若羊原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待羊原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
3T3細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞 COLO 205(結(jié)腸癌細(xì)胞) 人腎透明細(xì)胞癌;Caki-1 | 細(xì)胞角蛋白12抗體 |
蛋白酪激酶JAK-3抗體 | RNA聚合酶II抗體 |
22號染色體開放閱讀框23抗體 | 同源盒蛋白HOXB5抗體 |
Bcl-10抗體 | 葡萄糖6-N-乙?；D(zhuǎn)移酶1抗體 |
跨膜蛋白166抗體 | 心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體 |
α酶重鏈H4抗體 | 肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基AEpiCM-prf |
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S4 | Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 AAV-293( 胚腎細(xì)胞) |
1號染色體開放閱讀框150抗體 | TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-H1755 [H1755](人肺癌細(xì)胞) |
同源盒轉(zhuǎn)錄因子LMX1A抗體 | 293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GP 人成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
NOG Protein Human 重組人 Noggin / NOG 蛋白 (His 標(biāo)簽) | EL4(小鼠淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
流感病毒H3N2血凝素抗體 | tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5 |
髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體 | 羊原代乳腺上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS(RA.1) 大鼠胰腺星狀細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
SW1990細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人胸膜瘤細(xì)胞,SMC-1細(xì)胞 雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7 | NAALADL1 Others Mouse 小鼠 NAALADL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
ACLY Others Human 人 ACLY / acly / ATP ciate lyase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CM-M048小鼠腸巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
1.使用羊原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本羊原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響羊原代乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
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