詳細介紹
人原代宮頸癌相關(guān)成纖維細胞專用培養(yǎng)基
人原代宮頸癌相關(guān)成纖維細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人原代宮頸癌相關(guān)成纖維細胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代宮頸癌相關(guān)成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用人原代宮頸癌相關(guān)成纖維細胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代成纖維細胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復(fù)蘇人原代宮頸癌相關(guān)成纖維細胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查人原代宮頸癌相關(guān)成纖維細胞培養(yǎng)基密度。
2)細胞傳代:如果人原代宮頸癌相關(guān)成纖維細胞培養(yǎng)基密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗人原代宮頸癌相關(guān)成纖維細胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若人原代宮頸癌相關(guān)成纖維細胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待人原代宮頸癌相關(guān)成纖維細胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
原癌基因CD39樣蛋白4抗體 | 環(huán)指蛋白187抗體 |
酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體 | 成纖維細胞生長因子受體2抗體 |
細胞表面趨化因子受體4抗體 | 人母細胞瘤細胞;SH-SY5Y |
β淀粉樣肽1-40 C端/Aβ1-40 C端抗體 | 荊豆凝集素1抗體 |
酸化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1抗體 | 二肽氨基肽酶3抗體 |
A-498(人腎癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠單核巨噬細胞;J774A.1 | BEL-7405(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶輕鏈2抗體 | CL-0154MDCK(犬腎細胞)5×106cells/瓶×2 |
白三烯B4受體1抗體 | NCI-H226(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
氧化應(yīng)激反應(yīng)蛋白1抗體 | VLDLR Others Human 人 VLDLR / VLDL Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) |
α-L-艾杜糖苷酶抗體 | MARCO Others Mouse 小鼠 MARCO 人細胞裂解液 (陽性對照) |
外胚層皮層蛋白1抗體 | DPP7 Others Human 人 DPPII 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人原代宮頸癌相關(guān)成纖維細胞專用培養(yǎng)基CL-0398NCI-H2452(人間皮瘤細胞)5×106cells/瓶×2 |
MDA-MB-435 人癌高轉(zhuǎn)移細胞 | HPASMC Pellet 人肺動脈平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人肝臟細胞裂解物HHL |
TNFRSF1B Others Human 人 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細胞裂解液 (陽性對照) | KG-1(人急性骨髓性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1.使用人原代宮頸癌相關(guān)成纖維細胞培養(yǎng)基時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本人原代宮頸癌相關(guān)成纖維細胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響人原代宮頸癌相關(guān)成纖維細胞培養(yǎng)基正常使用。