詳細(xì)介紹
人原代膽脂瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基
人原代膽脂瘤細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人原代膽脂瘤細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代膽脂瘤細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人原代膽脂瘤細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代角質(zhì)細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復(fù)蘇人原代膽脂瘤細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查人原代膽脂瘤細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果人原代膽脂瘤細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗人原代膽脂瘤細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若人原代膽脂瘤細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待人原代膽脂瘤細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
上皮細(xì)胞膜蛋白3抗體 | 環(huán)指蛋白128抗體 |
24α7羥化酶抗體 | 成對螺旋細(xì)絲蛋白抗體 |
染色質(zhì)結(jié)合蛋白Cbx8抗體 | 人腎上皮細(xì)胞裂解物HREpiCL |
水通道蛋白1抗體 | 睫狀營養(yǎng)因子受體α抗體 |
酸化D酪激酶衰減蛋白1抗體 | 腦發(fā)育同源蛋白2抗體 |
Promocell C-21060 Airway Epithelial Cell GrowthMedium, 呼吸道上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml | 白細(xì)胞介素-6超家族 |
γ氨基運(yùn)載蛋白3抗體 | CL-0196RKO(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
微粒體谷甘肽S轉(zhuǎn)移酶1抗體 | WISH(人羊膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
衍生透明質(zhì)酸相關(guān)蛋白抗體 | M14(人黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 顱蓋造骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
親聯(lián)蛋白2抗體 | CD19 Others Human 人 CD19 / Leu-12 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
脫氧胞苷脫氨酶蛋白抗體 | Saos-2(人骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 Ephrin-A4 / EFNA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
ADAM9 Others Mouse 小鼠 ADAM9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 人原代膽脂瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基CL-0389NCI-H1688(人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
豬腎傳代細(xì)胞;IBRS-2 | R 1610(倉鼠肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HL-60(白血病原髓細(xì)胞) |
ECE1 Others Human 人 ECE1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | IAR20(大鼠肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 啤酒酵母 |
1.使用人原代膽脂瘤細(xì)胞培養(yǎng)基時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本人原代膽脂瘤細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響人原代膽脂瘤細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。