詳細(xì)介紹
大鼠原代牙齦上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
大鼠原代牙齦上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠原代牙齦上皮細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含大鼠原代牙齦上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠原代牙齦上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇大鼠原代牙齦上皮細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查大鼠原代牙齦上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果大鼠原代牙齦上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗大鼠原代牙齦上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若大鼠原代牙齦上皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待大鼠原代牙齦上皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
EB病毒核抗原1抗體 | 紅細(xì)胞生成素受體抗體 |
原癌基因CBL2抗體 | 叉頭蛋白I1抗體 |
Crk p38抗體 | 人胃腺癌細(xì)胞;BGC-823 |
活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 | 膠質(zhì)細(xì)胞系源性營養(yǎng)因子受體α2抗體 |
酸化4E結(jié)合蛋白1抗體 | 細(xì)胞周期調(diào)控蛋白SDP35抗體 |
CD38 Others Cynomolgus 食蟹猴 SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | Asp2人胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞;FC33 |
β淀粉樣肽(1-40)抗體 | CL-0283Ishikawa(人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | 人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30 |
血小板源性生長因子D(脊髓源性生長因子B) | GST Others Schistosoma japonicum 日本血吸蟲 Glutathione S-ansferase / GST |
組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶PCAF抗體 | CLEC1B Others Human 人 CLEC1B / CLEC2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
透明質(zhì)酸酶2/酸酶2抗體 | HEXB Others Human 人 Hexosaminidase B / HEXB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
HT-29細(xì)胞,人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,HME7細(xì)胞 SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;PUMC-HUVEC-T1 | 大鼠原代牙齦上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基小鼠支氣管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
NSC,大鼠干細(xì)胞 | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/duck/Hunan/795/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | K-562(人慢性骨髓性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 COLEC10 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
1.使用大鼠原代牙齦上皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本大鼠原代牙齦上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響大鼠原代牙齦上皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。