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詳細(xì)介紹
大鼠原代小腸隱窩上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
大鼠原代小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持大鼠原代小腸隱窩上皮細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含大鼠原代小腸隱窩上皮細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于大鼠原代小腸隱窩上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇大鼠原代小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查大鼠原代小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果大鼠原代小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗大鼠原代小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若大鼠原代小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待大鼠原代小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
末端補(bǔ)體復(fù)合物抗體 | 肺癌相關(guān)蛋白8抗體 |
細(xì)絲蛋白2抗體 | 營養(yǎng)因子3抗體 |
生殖細(xì)胞發(fā)育相關(guān)蛋白DAZL抗體 | BRL細(xì)胞，肝細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞,9L-E細(xì)胞 人上皮細(xì)胞RNAHMEpiC miRNA5 μg |
造血細(xì)胞酸酶抗體 | 肝細(xì)胞癌HHCM蛋白抗體 |
粒體甘油三酸脫氫酶2抗體 | 染色體脆弱性相關(guān)基因抗體 |
人心肌細(xì)胞-cDNAHCM-a cDNA | VNN1 Others Mouse 小鼠 VNN1 / Vanin-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
穿孔素抗體 | PC9人肺癌細(xì)胞 PC9 human lung cancer cells DMEM+10% FBS |
短粗矮胖19蛋白樣1抗體 | CD58 Others Cynomolgus 食蟹猴 LFA-3 / CD58 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
6號染色體開放閱讀框201抗體 | 間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基MSCM |
肝細(xì)胞生長調(diào)節(jié)因子酪激酶底物抗體 | 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-sf-prf |
抑素S/半蛋白酶抑制劑S抗體 | CM-R093大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
F344大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells | 大鼠原代小腸隱窩上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基KDR Others Mouse 小鼠 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
U251細(xì)胞，膠質(zhì)瘤細(xì)胞 鼠成纖維細(xì)胞系,NIH/3T3細(xì)胞 人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7 | 小鼠島細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
人真皮淋巴上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | CL-0205Sf-9(昆蟲細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
1.使用大鼠原代小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本大鼠原代小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會有少量絮狀物析出，不影響大鼠原代小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
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