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詳細(xì)介紹
F12 培養(yǎng)基
Ham's F-12最初是設(shè)計(jì)用于在無血清環(huán)境下培養(yǎng)CHO細(xì)胞的培養(yǎng)基。F-12除了作為CHO的無血清培養(yǎng)基之外，在添加血清后還被用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)，例如作為軟骨細(xì)胞和鼠前列腺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)基使用。
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇F12：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查F12密度。
2）細(xì)胞傳代：如果F12密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗F12 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若F12大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待F12生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;TALL-104 | 2號(hào)染色體開放閱讀框15抗體 |
基質(zhì)金屬蛋白酶28抗體 | 成對(duì)螺旋細(xì)絲蛋白抗體 |
母細(xì)胞瘤基因X染色體蛋白抗體 | 鉀離子通道蛋白家族KCNQ2抗體 |
原始廣泛存在蛋白1抗體 | DEPTOR蛋白抗體 |
G蛋白激活內(nèi)向鉀通道1抗體 | 丙型肝炎病毒NS5A抗體 |
核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A抗體 | BeWo細(xì)胞，人胎盤絨膜癌細(xì)胞 新生牛眼晶體上皮細(xì)胞,NBLE細(xì)胞 人無色素睫狀上皮細(xì)胞HNPCEpiC |
人胰腺癌細(xì)胞;AsPC-1 | CL-0308TE-13(人食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
血管緊張素原抗體 | 人真皮成纖維細(xì)胞-RNAHEF-a miRNA5 μg |
鈣依賴分泌激活蛋白2/自閉癥的相關(guān)蛋白抗體 | 95-C 低轉(zhuǎn)移肺癌 |
CLEC14A Others Mouse 小鼠 CLEC14A / EGFR-5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | USP46 Others Human 人 USP46 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
內(nèi)皮素-1抗體 | LDLR Others Mouse 小鼠 LDLR / LDL Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
9號(hào)染色體開放閱讀框46抗體 | F12 培養(yǎng)基CL-0347HCC38(人導(dǎo)管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞 | 人胚肺細(xì)胞系;KuMA |
牛陀螺狀細(xì)胞;BT | RBE細(xì)胞，人膽管癌細(xì)胞 小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞,ECA細(xì)胞 人羊膜上皮細(xì)胞 |
1.使用F12時(shí)應(yīng)注意無菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本F12的優(yōu)良使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響F12正常使用。
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