詳細(xì)介紹
HEK-293T 細(xì)胞專用培養(yǎng)基
HEK-293T細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持HEK-293T細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含HEK-293T細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HEK-293T細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
DMEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 435 ml
特級胎牛血清 50 ml
MEM NEAA非必需氨基酸 5 ml
GlutaMAX-1 5 ml
P/S 5 ml
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存1個月;-20℃,避光,保存3個月。
1)復(fù)蘇HEK-293T 細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查HEK-293T 細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果HEK-293T 細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗HEK-293T 細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若HEK-293T 細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待HEK-293T 細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用HEK-293T 細(xì)胞時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本HEK-293T 細(xì)胞的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響HEK-293T 細(xì)胞正常使用。
CD18: 整合素β2/Integrin β2抗體 0.1ml | NAV3: 元引導(dǎo)蛋白3抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh PVRL1/CD111/Nectin1 脊髓灰質(zhì)炎受體相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml | HDV IgG(Human Hepatitis D virus IgG) ELISA Kit 人丁型肝炎IgG 96T |
Apo J/Clusterin- Alpha/ Beta(Apolipoprotein J) 凝聚素α/β抗原 0.5mg | WISH人羊膜細(xì)胞 Human WISH cells MEM(GIBCO)+10%FBS |
Anti-Sema3F/FITC 熒光素標(biāo)記臂板蛋白3F抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | GRH ELISA Kit 大鼠促生長激素釋放激素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T |
TUNEL 細(xì)胞凋亡原位檢測試劑盒(我公司提供代測服務(wù)) 50人份 | Anti-CXCL4/PF-4/FITC 熒光素標(biāo)記血小板因子4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;MuM-2B | CD38 Others Human 人 SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
CECR2: 貓眼綜合征染色體候選基因2抗體 0.1ml | SNU-739人肝癌細(xì)胞 SNU-739 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS |
Rhesus antibody Rh ICAM5/Telencephalin 細(xì)胞間粘附分子5抗體 規(guī)格 0.1ml | USP46 Others Human 人 USP46 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Mose Anti-rat IgG/Gold 金標(biāo)記小鼠抗大鼠IgG (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml | 非洲綠猴腎細(xì)胞;GL-37 |
phospho-B Raf (Thr446 + Ser601): 0酸化B-Raf抗體 0.1ml | MGC80-3(MGC-803)人胃癌細(xì)胞 |
GSTCD: 硫轉(zhuǎn)移酶C段結(jié)構(gòu)域抗體 0.2ml | CM-H073人膀胱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
貓?jiān)醇?xì)胞 | HEK-293T 細(xì)胞專用培養(yǎng)基CSF2RB Others Rat 大鼠 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
LTEP-P細(xì)胞,人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 小鼠前成骨細(xì)胞,MC-3T3細(xì)胞 CL-0130K-562(人慢性骨髓性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
C26瘤 結(jié)腸癌 | 人胎盤羊膜細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |