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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的大鼠全骨髓細胞采用沖洗骨髓、紅細胞裂解法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的大鼠全骨髓經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠全骨髓原代細胞 | 組織來源 | 骨髓 |
英文名稱 | Rat Whole Bone Marrow Cells | 貨號 | YS-01X8256 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠全骨髓細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。全骨髓細胞即骨髓內除紅細胞外的全部細胞。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：懸浮
細胞形態(tài)：圓形
傳代特性：不增殖；不傳代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠全骨髓細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
人乙型肝病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA 試劑盒
Human tissue type plasminogen activator (t-PA) ELISA Kit 人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒
HumanIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAkit 人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanIerleukin5,IL-5試劑盒人白介素-5(IL-5)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織亮(leucine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
HumanIerleukin2，IL-2ELISAKit人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠透明質酸(HA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human heparan sulfate (HS) ELISA Kit 人類肝素(HS)試劑盒
Humanformylmethionine,fMetELISAKit 人甲酰甲硫(fMet)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickensolubleE-selectin,sE-selectin試劑盒雞可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細胞PDGF-B蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mouseferritin,FEELISAKit小鼠鐵蛋白(FE)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔血小板活化因子(rabbit PAF) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
兔P-選擇素(rabbit P-selectin) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
兔血小板衍化生長因子(rabbit PDGF) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
兔趨化因子(rabbit Raes) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
JAM3重組小鼠 JAM3 / JAM-C 蛋白 Protein
Beta-Amyloid(1-40 0.1mgBeta-Amyloid(1-40) β淀粉樣肽(1-40)(多肽蛋白)
DCX重組人 DCX 蛋白 (aa 45-150, GST 標簽) Protein
HDAC3 Protein Human 重組人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 蛋白 (His & GST 標簽)
ICOS Protein Rat 重組大鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標簽)
CM-R038大鼠肝內膽管上皮細胞狗腎細胞隆突型;MDCK superdome TP63 Others Human 人 P63 / TP63 / Tumor 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 CD59 Others Human 人 CD59 人細胞裂解液 小鼠原代腎小管上皮細胞 兔原代肝成纖維細胞
大鼠全骨髓原代細胞MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13 0.5mgMMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基質金屬蛋白酶13抗原
JAM3 Protein Human 重組人 JAM3 / JAM-C 蛋白
FCGRT & B2M重組食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein
SEMA5A Protein Mouse 重組小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白
CLIC4重組人 CLIC4 蛋白 Protein
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