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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人腦動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人腦動脈血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人腦動脈血管平滑肌原代細胞 | 組織來源 | 腦動脈組織 |
英文名稱 | Human Brain Artery Vascular Smooth Muscle Cells | 貨號 | YS-01X7373 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人腦動脈血管平滑肌細胞分離自腦動脈組織；腦動脈有成對的頸內(nèi)動脈和椎動脈互相銜接成動脈循環(huán)；靜脈系多不與同名動脈拌行，所收集的靜脈血先進入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈；各級靜脈都沒有瓣膜。它包括腦的動脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。腦動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
原代表皮角化細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml | NGB： 腦紅蛋白/神紅蛋白/球蛋白抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh MDM2 雙微體2癌基因抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-TREM1/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠髓系細胞觸發(fā)受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rarres2/TIG2/Chemerin(Retinoic acid receptor responder protein 2) 酸受體應(yīng)答蛋白2抗原 0.5mg | Anti-OAT-1/SLC22A6 陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
Anti-FSP/Spastin/FITC 熒光素標記抗纖維母細胞表面抗原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLC5A8 碘轉(zhuǎn)運體蛋白8抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-PEA3/FITC 熒光素標記多瘤促活化因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-AR Alpha1/FITC 熒光素標記α1能受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
CD59 Others Human 人 CD59 人細胞裂解液 (陽性對照) | SERPINF1 Others Mouse 小鼠 SerpinF1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人腦瘤細胞;SF767 | 人外殼細胞(HHorSC)( 5×105 ) |
HWP-c visceral 人類白前脂肪細胞(HWP)內(nèi)臟 500,000cells 人腸微血管內(nèi)皮細胞HIMEC | CD8A Others Rat 大鼠 CD8A / Lyt2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H6N1 甲型流感 H6N1 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) | FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A CHO細胞裂解液 (陽性對照) |
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5 | 人腦動脈血管平滑肌原代細胞Anti-OAT-1/SLC22A6 陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
KIT Others Rat 大鼠 KIT / c-KIT 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人細胞;Hela P10s-11F |
牛腎細胞;MDBK | B16(小鼠黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R107大鼠海馬元細胞培養(yǎng)基100mL EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0920 |
SW-13細胞，人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞 豬細胞系(ST),ST細胞 CL-0422RBL-1(大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞)5×106cells/瓶×2 | GPR78： G蛋白偶聯(lián)受體78抗體 0.2ml |
Human Haptoglobin,Hpt/HP ELISA KIT 人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | CD4 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
鼠抗人β2微球蛋白抗體 Anti-β-2-MG 0.1ml | trypsin ELISA Kit 大鼠酶 96T |
ARNTL2： 芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣2抗體 0.2ml | CD59 Others Human 人 CD59 人細胞裂解液 (陽性對照) |
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