化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
人腦膜原代細(xì)胞
人腦膜細(xì)胞分離自腦膜組織；腦膜是顱骨與腦間的隔膜，一共有三層，由外向內(nèi)為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜。腦膜細(xì)胞圍繞著大腦，參與中樞系統(tǒng)的正常發(fā)育，能穩(wěn)定腦軟膜表面的細(xì)胞外基質(zhì)、組織放射狀膠質(zhì)細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)和小腦皮層分層結(jié)構(gòu)。
英文名稱 | Human Meningeal Cells | 組織來源 | 腦膜組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7382 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人腦膜細(xì)胞
組織來源：腦膜組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人腦膜采用消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人腦膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24 涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞，Acc-2細(xì)胞 104C1細(xì)胞，轉(zhuǎn)化的豚鼠胎體細(xì)胞 | ANKS1B： β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml |
Anti-HIV-1 ENV(gp160) 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | Rhesus antibody Rh ABCG8 三0酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員8抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti- Beta-catenin/ Beta-cats /FITC 熒光素標(biāo)記 β-連環(huán)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IFI78/MX1 干擾素誘導(dǎo)蛋白P78抗體 規(guī)格 0.1ml |
M2-PK ( pyruvate Kinase M2 ) 酸激酶-M2(抗原) 0.5mg | Hyaluronidase-1： 透明質(zhì)酸酶/酸酶抗體 0.1ml |
IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM155A FAM155A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
人腎小管上皮細(xì)胞;HKC | CM-H122人星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
(+)9811細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞 人骨肉瘤細(xì)胞,SP20細(xì)胞 人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞;HFSF | DU 145(人前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
CM-M096小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠原B細(xì)胞株;BaF3 |
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO | E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細(xì)胞株 淋巴瘤細(xì)胞,U-937細(xì)胞 NCI-N87(人胃癌細(xì)胞) | 人腦膜原代細(xì)胞Rhesus antibody Rh IFI78/MX1 干擾素誘導(dǎo)蛋白P78抗體 規(guī)格 0.1ml |
豚鼠源細(xì)胞 | PPP3R1 Others Human 人 PPP3R1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
OCM-1細(xì)胞，人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞 繩狀青霉 小鼠T淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;Cyc-Tag(S49) | 人腦血管平滑肌細(xì)胞HBVSMC |
HSC-T6, 大鼠肝星狀細(xì)胞系 | Rhesus antibody Rh IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG 規(guī)格 0.1ml |
MP-Ab(Human Mycoplasma pneumoniae antibody) ELISA Kit 人肺炎支原體抗體 96T | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LoVo |
ADFP/ADRP/adipophilin 脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | 6-K-PG(Human 6-keto-prostaglandin) ELISA Kit 人6酮前列腺素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
MAP LC3 Beta： 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈β3抗體 0.1ml | 人腎小管上皮細(xì)胞;HKC |
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