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詳細介紹
人外周血單個核原代細胞
人外周血單個核細胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。外周血單個核細胞(PBMC)即外周血中具有單個核的細胞，包括淋巴細胞和單核細胞。目前，主要的分離方法是密度梯度離心法，因為血液中各有形成分的比重存在差異，因此得以分離出不同的細胞。
英文名稱 | Human Peripheral Blood Mononuclear Cells | 組織來源 | 外周血 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X7487 |
細胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：人外周血單個核細胞
組織來源：外周血
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人外周血單個核采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人外周血單個核經過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
新生牛眼晶體上皮細胞;NBLE | AT ELISA Kit 大鼠抗酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf124： 1號染色體開放閱讀框124抗體 0.2ml | Glutamate receptor 3： 谷酸受體3抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh CEE 跨膜結構域邊緣蛋白CEE抗體 規(guī)格 0.2ml | PRMT5： 組蛋白精酸甲基轉移酶5抗體 0.2ml |
Anti-Phospho-eNOS (Thr495)/FITC 熒光素標記0酸化合成酶3抗體(內皮型)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | FSH(Follicle-stimulating hormone precursor) 促卵泡刺激素抗原 0.5mg |
Goat Anti-Guinea IgG/Gold 金標記羊抗豚鼠IgG (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml | MOG： 髓鞘少樹突膠質細胞糖蛋白抗體 0.1ml |
FUCA1 Others Human 人 FUCA1 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人胚肺二倍體細胞;HL 人小腸粘膜上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
人類原巨核細胞型白血病細胞;UT-7 | LAG3 Others Rat 大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
IL1R2 Others Human 人 IL1R2 / CD121b 人細胞裂解液 (陽性對照) | HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0908 人破骨細胞培養(yǎng)基 100mL | HO-8910細胞，人卵巢癌細胞 小鼠淋巴結血管上皮樣細胞,SVEC4-10細胞 腎動脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1 | 人外周血單個核原代細胞PRMT5： 組蛋白精酸甲基轉移酶5抗體 0.2ml |
小鼠血細胞;WEHI-3 [WEHI3] 小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | 人間充質干細胞-臍帶 |
小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH3 | TNFSF8 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) |
AGT Others Human 人 AGT / SerpinA8 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-IL-11/FITC 熒光素標記白介素11抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
anti-Rb/P105 RB 成視網膜細胞瘤抑癌蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | JAR細胞，胎盤絨毛癌細胞 人食管鱗癌,KYSE30細胞 中國倉鼠卵巢細胞系;pDSr a2-mpl-X |
Rhesus antibody Rh phospho-GSK-3 Beta(Ser21) 0酸化葡萄糖合成激酶3β抗體 GSK3α(Phospho-Ser21) 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLF6/PAC1 轉染抑癌基因KLF6抗體 規(guī)格 0.1ml |
AMPK ELISA Kit 魚0酸化腺苷酸活化蛋白激酶 96T | FUCA1 Others Human 人 FUCA1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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