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詳細介紹
人心肌成纖維原代細胞
人心肌成纖維細胞分離自心臟組織；心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成，非心肌細胞占細胞總數(shù)的70%，其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的心肌成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。近年來，人們逐漸了解到非心肌細胞不僅對心肌細胞具有結(jié)構(gòu)上的支持、保護作用，而且還具有自分泌和旁分泌功能，影響心肌細胞的結(jié)構(gòu)和生理功能；心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負責細胞基質(zhì)外的合成，當心肌損傷時能產(chǎn)生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結(jié)締組織中常見的細胞，可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機基質(zhì)，并且在外傷等因素刺激下，部分纖維細胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細胞，其功能活動也得以恢復，參與組織損傷后的修復。因此，對心肌成纖維細胞的生理學研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個重點。
英文名稱 | Human Cardiac Fibroblast Cells | 組織來源 | 心臟組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7280 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人心肌成纖維細胞
組織來源：心臟組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人心肌成纖維采用膠原酶-聯(lián)合消化結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人心肌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
心肌成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | NMDAR2C： 谷酸受體2C抗體(N端) 0.1ml |
Rhesus antibody Rh MCM7 染色體維持缺陷蛋白7抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-TRPM2 /FITC 熒光素標記瞬時受體電位離子通道蛋白抗體(M亞家族)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
SUMO 類泛素蛋白 0.5mg | Anti-OPCML 樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細胞粘附分子樣蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-GAD-65/FITC 熒光素標記谷脫羧酶-65抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLC27A5 脂肪酸轉(zhuǎn)運蛋白5抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-P-fscn1/FITC 熒光素標記0酸化纖維束蛋白同源物1/肌動蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-phospho-ASK1(Thr845) /FITC 熒光素標記兔抗人、小鼠0酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
CD86 Others Rat 大鼠 CD86 / B7-2 人細胞裂解液 (陽性對照) | Gibco 17100017 Collagenase Type I 1g |
人晶狀體上皮細胞裂解物HLEpiCL | ALDH3A1 Others Human 人 ALDH3A1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
HCM-c 人類心肌細胞 500,000cells 人肺動脈平滑肌細胞HPASMC | IL18R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18R1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HDBEC-c 人類皮膚血內(nèi)皮細胞(HDBEC)來自少年者 500,000cells 肝動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | MBL2 Others Human 人 MBL2 / MBL / COLEC1 CHO細胞裂解液 (陽性對照) |
SGC-7901, 人胃腺癌細胞系 | 人心肌成纖維原代細胞Anti-OPCML 樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細胞粘附分子樣蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
RK2 Others Rat 大鼠 kB / RK2 人細胞裂解液 (陽性對照) | MiaPaCa-2, 人胰腺癌細胞 |
平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM-sf | AR42J(大鼠胰腺外分泌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R075大鼠主動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL 人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞;WPMY-1 |
SNU-638人胃癌細胞 Human gasic cancer cells SNU-638 1640+10% FBS | GDF8： 生長分化因子8/肌肉抑制素抗體 0.2ml |
Human Anti-Thrombin III ,AT- III ELISA Kit 人抗Ⅲ抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | ERN1 Others Human 人 ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 Anti-VEGFR2/VEGF-R2/Flk1 0.1ml | INS ELISA Kit 大鼠胰島素 96T |
ADORA1： 腺苷A1A受體抗體 0.2ml | CD86 Others Rat 大鼠 CD86 / B7-2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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