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詳細介紹
小鼠表皮角化上皮原代細胞
小鼠表皮角化細胞分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層，由胚胎時期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角化細胞（KC）是構(gòu)成表皮的主要細胞成分，在體內(nèi)處于不斷增殖過程中，分裂的角化細胞主要位于其基底層，少數(shù)位于棘細胞層。隨著向表層的推移，細胞的分化程度逐漸增加，并喪失分裂活性。
英文名稱 | Mouse Epidermal keratinized epithelial Cells | 組織來源 | 皮膚組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7635 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠表皮角化上皮細胞
組織來源：皮膚組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠表皮角化上皮細胞先蛋白酶消化、后-膠原酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠表皮角化上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
兔腎細胞;RK13 | 完整膜蛋白E25A抗體 |
蛋白酶調(diào)解因子6抗體 | 信號轉(zhuǎn)導蛋白9復合體7b抗體 |
肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶FKBP10抗體 | 黑色素瘤相關(guān)抗原/黑色素-A抗體 |
鈣網(wǎng)蛋白抗體 | DIRAS2蛋白抗體 |
1號染色體開放閱讀框55抗體 | 舞蹈癥相關(guān)蛋白1抗體 |
NOV Others Canine 狗 CCN3 / NOV 人細胞裂解液 (陽性對照) | Promocell C-28040 Pericyte Growth Medium, 周細胞生長培養(yǎng)基 500ml |
人成纖維細胞;HFF | TGFBR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TGFBR2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
A-375(人惡性黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H123人小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基100mL 人胚肺二倍體細胞;KMB-17 | CHN1 Others Human 人 CHN1 / Chimerin 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
PVR Others Human 人 CD155 / PVR 人細胞裂解液 (陽性對照) | BNL CL.2小鼠胚胎肝細胞 BNL CL.2 mouse embryo liver cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS |
CM-R015大鼠胰島細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠表皮角化上皮原代細胞黑色素瘤相關(guān)抗原/黑色素-A抗體 |
SUNE-1亞株13-9B細胞，人鼻咽癌細胞系 小鼠胚胎成纖維細胞,BALB/3T3 clone A31細胞 CM-H063人腎皮層上皮細胞培養(yǎng)基100mL | 人脈絡叢成纖維細胞總RNAHCPF NA |
CM-H098人真皮微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL | DSC2 Others Rat 大鼠 DSC2 / Desmocollin-2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
S100A4 Others Human 人 S100A4 人細胞裂解液 (陽性對照) | 周期素依賴性激酶4抗體 |
李斯特菌溶胞素抗體 | NCI-H23細胞，人非小細胞肺癌細胞 小鼠成纖維細胞,3T3NIH細胞 CM-R087大鼠軟骨細胞培養(yǎng)基100mL |
有絲分裂檢驗點蛋白BubR1抗體 | 粘蛋白抗體 |
高爾基體轉(zhuǎn)運蛋白1A抗體 | NOV Others Canine 狗 CCN3 / NOV 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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