詳細介紹
小鼠脊髓星形膠質(zhì)原代細胞
小鼠脊髓星形膠質(zhì)細胞分離自脊髓組織;脊髓是細細的管束狀的結(jié)構(gòu),位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護;是源自腦的中樞系統(tǒng)延伸部分。中樞系統(tǒng)的細胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的信息。人和脊椎動物中樞系統(tǒng)的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發(fā)出成對的,分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個H形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū),主要由細胞構(gòu)成;在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),主要由有髓纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的(稱為脊)分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié),31對脊就是由不同的脊椎發(fā)出的。系統(tǒng)基本的結(jié)構(gòu)和功能單位是元,即細胞,其大小和外觀在中樞系統(tǒng)中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體,內(nèi)含絲、微管、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和一個有明顯核仁的核。一些大元突起的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可用Nissl染色顯示,在光鏡下是灰藍色斑塊狀,稱為尼氏小體。樹突和軸突是元的突起,能在元之間傳遞電沖動,突起的大小和形態(tài)各不相同,很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別。
英文名稱 | Mouse Spinal Cord Astrocyte Cells | 組織來源 | 脊髓組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7630 |
細胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠脊髓星形膠質(zhì)細胞
組織來源:脊髓組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠脊髓星形膠質(zhì)采用消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠脊髓星形膠質(zhì)經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
P388D1細胞,淋巴瘤細胞 人結(jié)腸腺癌細胞,HCT-8細胞 CM-H020人胰島β細胞培養(yǎng)基100mL | 過氧化物酶體生成蛋白5相關(guān)蛋白抗體 |
S100A14/15抗體 | 細胞角蛋白1抗體 |
β1/β-1,4-GalNAc-T抗體 | 蛋白酸酶2A抑制劑1抗體 |
絲蛋白抗體 | 葡萄糖合成酶抗體 |
鋅指蛋白DZIP1抗體 | 畸胎瘤衍化生長因子抗體(N端) |
大鼠骨骼肌成肌細胞;L6 | NCI-H1395 人肺腺癌細胞 |
Raw264.7, 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞 | LGALS1 Protein Human 重組人 Galectin-1 / LGALS1 蛋白 |
小鼠腎上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | IL27 Protein Human 重組人 IL27 / Ierleukin-27 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞;WPMY-1 | 293E(人胚腎細胞(EBNA1基因修飾)) 5×106cells/瓶×2 |
97H人肝癌細胞 97H human hepatocarcinoma cells DMEM+10%FBS | 小鼠脊髓星形膠質(zhì)原代細胞蛋白酸酶2A抑制劑1抗體 |
RL95-2, 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系 Human | SIRP-BETA Others Mouse 小鼠 SIRPB1A / SIRP beta 1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
QG-56細胞,人肺扁平上皮癌細胞 中國倉鼠倉鼠卵巢細胞亞株,CHO-K1細胞 CM-M010小鼠肺大動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL | 尿道上皮細胞培養(yǎng)基UCM-prf |
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3 | 髓系細胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體 |
副溶血性弧菌菌體鞭毛蛋白抗體 | tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3 |
有絲分裂激酶A/B/C抗體 | 半乳糖凝集素10抗體 |
跨膜蛋白Sema3C抗體 | 大鼠骨骼肌成肌細胞;L6 |
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。