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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠腦動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠腦動脈血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠腦動脈血管平滑肌原代細胞 | 組織來源 | 腦動脈組織 |
英文名稱 | Mouse Brain Artery Vascular Smooth Muscle Cells | 貨號 | YS-01X7336 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠腦動脈血管平滑肌細胞分離自腦動脈組織；腦動脈有成對的頸內(nèi)動脈和椎動脈互相銜接成動脈循環(huán)；靜脈系多不與同名動脈拌行，所收集的靜脈血先進入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈；各級靜脈都沒有瓣膜。它包括腦的動脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。腦動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
AE-1雜交瘤細胞抗AChE AE-1 hybridoma cells against AChE DMEM+10% Hyclone 滅活血清 | 含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族13抗體 |
SET結(jié)合蛋白1抗體 | 細胞膜鈣ATP酶1抗體 |
鹵酸脫鹵酶樣水解酶域內(nèi)含蛋白1A抗體 | 蛋白酶體PSMα3抗體 |
突出相關(guān)蛋白Slitrk1抗體 | 前列環(huán)素合成酶抗體 |
鋅指結(jié)構(gòu)蛋白酶20抗體 | 3/血管素3抗體 |
IGF2BP2 Protein Human 重組人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 標簽) | JAR 人胎盤絨毛癌細胞 |
RWPE-1人正常前列腺上皮細胞 RWPE-1 of normal human prostate epithelial cells K-SFM+0.05mg/ml BPE+5ng/ml EGF | FIGF Protein Human 重組人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 標簽) |
小鼠小梁網(wǎng)細胞培養(yǎng)基 100mL | IL25 Protein Rat 重組大鼠 Ierleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 標簽) |
大鼠腎足突細胞培養(yǎng)基 100mL | CL-0247ZR-75-1(人癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
C6-RFP(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞 C6-RFP (leiviral consuct stable sain) of rat brain glioma cells DMEM+10% FBS | 小鼠腦動脈血管平滑肌原代細胞蛋白酶體PSMα3抗體 |
冠狀動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人細胞;C-33A 大鼠主動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
CPB2 Others Human 人 CPB2 / Carboxypeptidase-B2 人細胞裂解液 (陽性對照) | IL12A & IL27B Protein Human 重組人 IL12A & IL27B Heterodimer 蛋白 |
腸動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 胎盤特異基因8蛋白抗體 |
富含亮重復蛋白15抗體 | 人視網(wǎng)膜色素上皮細胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg |
有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白2抗體 | 胞漿動力蛋白輕鏈1抗體 |
醌氧化還原酶抗體 | IGF2BP2 Protein Human 重組人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 標簽) |
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