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詳細介紹
小鼠腦靜脈血管平滑肌原代細胞
小鼠腦靜脈血管平滑肌細胞分離自腦靜脈組織；與腦動脈相比，腦靜脈管壁較薄。與身體其他部位的靜脈不同，腦靜脈管壁中沒有靜脈瓣，靜脈血的回流依賴高位的勢能。腦靜脈血的回流路徑可以歸納為：大部腦靜脈血經(jīng)腦深部靜脈和腦血竇流入頸內(nèi)靜脈；小部腦靜脈血經(jīng)眼部翼狀靜脈叢，進入靜脈導(dǎo)血管再到頭皮，后流入椎管中的椎旁靜脈系統(tǒng)。腦靜脈系統(tǒng)有大量交通枝靜脈叢，即使兩側(cè)頸內(nèi)靜脈都被阻塞，大腦靜脈血仍可經(jīng)椎靜脈和頸外靜脈系統(tǒng)完成其回流。腦靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。
英文名稱 | Mouse Brain Venous Vascular Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 腦靜脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7341 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠腦靜脈血管平滑肌細胞
組織來源：腦靜脈組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠腦靜脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠腦靜脈血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
WEHI 22.1細胞，B淋巴細胞 人肝內(nèi)膽管上皮細胞,HIBEpiC細胞 CL-0096HCT 116(人結(jié)腸癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 含錨蛋白重復(fù)序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族17抗體 |
SET易位蛋白/髓系白血病相關(guān)蛋白抗體 | 細胞膜鈣ATP酶4B抗體 |
卵巢、胎盤、前列腺、蛋白22抗體 | 蛋白酶體PSMα4/20S Proteasome α4抗體 |
突觸蛋白NGL3抗體 | 前列環(huán)素受體抗體 |
鋅指脂蛋白-1b抗體 | 4抗體 |
中國倉鼠卵巢細胞-二氫還原酶缺陷型;CHO/dhFr- | 皮膚肥大細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
幼蚊細胞;C6/36 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤，PC-12細胞 HeLa 229(細胞) | 人喉癌上皮細胞;Hep-2 |
人前列腺微血管內(nèi)皮細胞HPrMEC | KP-N-NS(人腎上腺母細胞瘤細胞(腦轉(zhuǎn)移)) 5×106cells/瓶×2 |
C57小鼠黑色素瘤瘤株;ME (Me) | 犬胸腺細胞;cf2Th |
JCA-1細胞，人前列腺癌細胞 大鼠骨骼肌成肌細胞,L6細胞 小鼠少突膠質(zhì)前體細胞MOPC | 小鼠腦靜脈血管平滑肌原代細胞蛋白酶體PSMα4/20S Proteasome α4抗體 |
IFNA2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA2 / Ierferon alpha 2 蛋白 (His 標簽) | 人外殼細胞(HHorSC)( 5×105 ) |
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1 腺癌細胞，SK-BR-3細胞 RK-13細胞，兔腎細胞系 | 小鼠腎系膜細胞培養(yǎng)基 100mL |
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5 | 胎盤受體蛋白2抗體 |
富含亮重復(fù)蛋白25抗體 | MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞 |
有絲分裂阻滯缺陷蛋白2抗體 | 胞漿動力蛋白中間鏈1抗體 |
醌氧化還原酶樣蛋白1抗體 | 中國倉鼠卵巢細胞-二氫還原酶缺陷型;CHO/dhFr- |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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