詳細介紹
小鼠前列腺平滑肌原代細胞
小鼠前列腺平滑肌細胞分離自前列腺組織;前列腺(Prostate)是雄性的性腺器官;前列腺是不成對的實質(zhì)性器宮,由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺如栗子,底朝上,與膀胱相貼,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面貼恥骨聯(lián)合,后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過,扼守著尿道上口,所以,前列腺有問題時,排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的,具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是構(gòu)成精液主要成分;作為內(nèi)分泌腺,前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。前列腺平滑肌細胞是前列腺的重要結(jié)構(gòu)組成細胞之一,在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。前列腺平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。
英文名稱 | Mouse Prostate Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 前列腺 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7557 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠前列腺平滑肌細胞
組織來源:前列腺
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠前列腺平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠前列腺平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | 白細胞介素-10抗體 |
天門冬甲基轉(zhuǎn)移酶PCMT抗體 | 心臟鈣粘蛋白抗體 |
腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7抗體 | 單氨氧化酶A+B抗體 |
CD45RO抗體 | DUX3蛋白抗體 |
嘧啶cP450 CYP26A1抗體 | HOMER2抗體 |
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/4664T/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | AXL Others Human 人 Axl Kinase 人細胞裂解液 (陽性對照) |
臍動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | EFNA1 Others Rat 大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
LAYN Others Human 人 Layilin 人細胞裂解液 (陽性對照) | SERPINI1 Others Mouse 小鼠 SerpinI1 / Neuroserpin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Promocell C-26030 Renal Epithelial Cell GrowthMedium 2, 腎上皮細胞生長培養(yǎng)基2型(即用型) 500ml | 豬腎細胞;PK(15) 骨髓瘤細胞,FO細胞 G422細胞,KM小鼠腦膠質(zhì)母細胞瘤瘤株 |
CM-H084人臍靜脈平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠前列腺平滑肌原代細胞單氨氧化酶A+B抗體 |
T-107B蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL | 人腦微血管內(nèi)皮細胞裂解物HBMECL |
小鼠髖動脈內(nèi)皮細胞;PIEC | FGFR4 Others Rat 大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
F81(貓腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0281HELF(人胚肺成纖維細胞)5×106cells/瓶×2 犬腎細胞;MDCK(NBL-2) | 鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性絲蛋白激酶抗體 |
鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 | 人胎盤絨膜癌細胞;BeWo 大鼠膀胱成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL |
轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白BACH2抗體 | 核酪蛋白激酶和細胞周期蛋白依賴性激酶底物1抗體 |
β上腺素能受體激酶2抗體 | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/4664T/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |