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詳細介紹
小鼠主動脈外膜成纖維原代細胞
小鼠主動脈外膜成纖維細胞分離自主動脈血管外膜組織；血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成，其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結(jié)締組織細胞以成纖維細胞為主，當(dāng)血管受損傷時，成纖維細胞具有修復(fù)外膜的能力。有的動脈中膜和外膜的交界處，有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細胞是血管外膜的主要組成細胞之一，其主要生理功能合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。
英文名稱 | Mouse Aortic Adventitial Fibroblast Cells | 組織來源 | 主動脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7642 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠主動脈外膜成纖維細胞
組織來源：主動脈組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳1-2代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠主動脈外膜成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠主動脈外膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
人永生化淋巴細胞;CNLMG-B5537LC | IQCJ蛋白抗體 |
抗體 | 10號染色體開放閱讀框93抗體 |
內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2抗體 | 毒蕈堿樣蛋白3抗體 |
巨細胞病毒PP65/CMV低基質(zhì)0脂蛋白抗體 | 干擾細胞癌蛋白2抗體 |
9號染色體開放閱讀框79抗體 | 乙肝病毒pre S1/S2蛋白抗體 |
RK2 Others Mouse 小鼠 RK2 / kB 人細胞裂解液 (陽性對照) | Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
獼猴肺細胞;MML2 | 人氣管平滑肌細胞 (HTSMC)( 5×105 ) |
CA14 Others Human 人 CA14 人細胞裂解液 (陽性對照) | NLGN1 Others Mouse 小鼠 Neuroligin 1 / NLGN1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HT-1080(人纖維肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 LX-2, 人肝星形細胞株 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KM9401 | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CL-0443SK-N-MC(人上皮瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | 小鼠主動脈外膜成纖維原代細胞毒蕈堿樣蛋白3抗體 |
COL9A1 Others Human 人 COL9A1 人細胞裂解液 (陽性對照) | EFNA3 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
人低分化肺腺癌細胞;SK-LU-1 | MMP1 Others Human 人 MMP1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Saos-2細胞，成骨肉瘤細胞 人鼻咽癌細胞,HNE1細胞 CL-0273ECV-304(人臍靜脈內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×2 | 鈣粘附分子18抗體 |
鉀離子通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 | FSTL1 Others Mouse 小鼠 FSTL1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
腺苷酸激酶抗體 | 分子生物鐘調(diào)控蛋白NOC抗體 |
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶輕鏈1抗體 | RK2 Others Mouse 小鼠 RK2 / kB 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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