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詳細(xì)介紹
小鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)原代細(xì)胞
小鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí)，可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜，由上皮（屬單層柱狀上皮，有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種）和固有膜（由結(jié)締組織構(gòu)成，其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞，稱為基質(zhì)細(xì)胞）組成，子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層，功能層較厚，約占內(nèi)膜厚度的4/5；基底層較薄較致密，約占1/5，功能層可剝脫，而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動(dòng)物子宮壁的內(nèi)層，位于子宮腔面，在動(dòng)物生殖生理活動(dòng)中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動(dòng)物生理功能和生育能力的重要器官，子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
英文名稱 | Mouse Endometrial Mesenchymal Cells | 組織來(lái)源 | 子宮 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X8080 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞
組織來(lái)源：子宮
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡(jiǎn)介
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;CFPAC-1 | 整合素α4β7抗體 |
0脂酶A2激活蛋白抗體 | 腫瘤標(biāo)志物CYFRA21-1抗體 |
黃熱病毒包膜糖蛋白抗體 | 黑色素瘤抗原F蛋白家族1抗體 |
周期素D2抗體 | 短鏈脫氫還原酶13抗體 |
間隙連接蛋白43抗體 | 肝癌相關(guān)抗原hca25a |
ERBB2 Others Mouse 小鼠 HER2 / ErbB2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | MCF-7(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
貓腎細(xì)胞;CRFK | 人顱骨造骨細(xì)胞 (HCO) ( 5×105 ) |
TNFRSF17 Others Mouse 小鼠 TNFRSF17 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | HA Others H12N1 甲型流感 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
CD5 Others Mouse 小鼠 CD5 / LEU1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | HPAEC Pellet 人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 心肌細(xì)胞生長(zhǎng)添加物CMGS |
CL-0435SF126(人腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 小鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)原代細(xì)胞黑色素瘤抗原F蛋白家族1抗體 |
IL18BP Others Human 人 IL18BPa 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17 |
小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH3 | EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細(xì)胞;B95-8 膀胱癌細(xì)胞，J82細(xì)胞 GBC-SD(膽囊癌細(xì)胞) |
IL11RA Others Canine 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框91抗體 |
Kelch樣蛋白8抗體 | 人胚腎上皮細(xì)胞系;KiMA 人直腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
酸化肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體 | 肽S抗體 |
G蛋白激活內(nèi)向鉀通道3抗體 | ERBB2 Others Mouse 小鼠 HER2 / ErbB2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi)；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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