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單細胞分離不理想，您需要了解新的技術(shù)和技巧
閱讀：285 發(fā)布時間：2022-8-18
如今，單細胞多組學分析正在如火如荼地開展，各大雜志上不斷有重磅的新成果發(fā)表。也許您也躍躍欲試，不過在此之前，您需要分離出單細胞。
您理想中的單細胞分離是不是快速而高效的，而現(xiàn)實中的過程也許是低效而漫長的。在此，我們將介紹一些新的細胞分離技術(shù)并分享一些操作時的小技巧。
細胞分離的挑戰(zhàn)：
準備分離單細胞的研究人員必須克服許多挑戰(zhàn)。他們希望獲得純正的目標細胞群，且細胞的各種特征都保持不變。如何才算不錯的分離方法？它應當保持細胞活力，提供足夠數(shù)量的細胞，并且可根據(jù)未來的需求而擴展。它還能夠防止細胞聚集，并且操作起來相對簡單，費用也不太高。
新興的微流體技術(shù)：
與傳統(tǒng)的FACS相比，新型微流體細胞分選儀具有不少優(yōu)勢。它們使用較低的分選壓力，降低了SICS的風險。它們所需的樣本量也較少，可將樣本加入一次性的微流體芯片中進行分選?；谖⒘黧w芯片的細胞分選儀的優(yōu)勢不僅在于處理微升級的樣本。近年來，微流體技術(shù)已與其他學科整合在一起，進一步加強單細胞分離。
單細胞分離的小技巧：
1、縮短制備單細胞懸液的時間，以保留細胞活力；
2、考慮使用細胞篩來過濾出細胞團塊或雙細胞；
3、注意緩沖液的選擇，包括分選和收集溶液；
4、如果您打算在分選后培養(yǎng)細胞，請使用對數(shù)生長期的細胞，并確定理想培養(yǎng)條件；
5、在分選轉(zhuǎn)染后的細胞時，通常在轉(zhuǎn)染后72小時進行，以提高細胞群的生存能力；
6、如果采用熒光抗體來分離稀有細胞，請在染色前離心抗體，以便去除任何可能被誤認為是靶細胞的熒光顆粒；
7、對于單細胞分離，在分選后別忘了離心平板，以確保細胞在孔的底部；
8、選擇一種可靠的分析技術(shù)來評估分選細胞的數(shù)量和質(zhì)量。