SPR分子互作儀是一種基于光學(xué)原理的實(shí)時監(jiān)測技術(shù),廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、化學(xué)、藥物開發(fā)等領(lǐng)域,特別是在研究分子之間的相互作用時具有不可替代的優(yōu)勢。通過測量分子在固體表面上與溶液中分子的相互作用,獲得高靈敏度的實(shí)時數(shù)據(jù)。

SPR分子互作儀的工作原理:
1.激發(fā)表面等離子體
當(dāng)激光光束以一定的角度照射到金屬表面時,若入射角滿足一定條件,光能會激發(fā)金屬表面自由電子產(chǎn)生等離子波,從而在金屬表面形成表面等離子波。此時,部分光能被轉(zhuǎn)化為表面等離子波,導(dǎo)致反射光強(qiáng)度下降。
2.分子結(jié)合與反射光變化
在SPR實(shí)驗(yàn)中,金屬表面通常會修飾一層生物分子(如抗體、受體等),這些分子可以與溶液中的目標(biāo)分子發(fā)生特異性結(jié)合。當(dāng)目標(biāo)分子與金屬表面上的生物分子結(jié)合時,會改變表面附近的折射率,進(jìn)而影響表面等離子體的共振角。通過實(shí)時監(jiān)測反射光強(qiáng)度的變化,可以得到分子相互作用的動力學(xué)信息。
3.數(shù)據(jù)分析
SPR儀器通過改變?nèi)肷涔獾慕嵌?,?shí)時監(jiān)測反射光強(qiáng)度的變化。當(dāng)分子結(jié)合在金屬表面時,折射率發(fā)生變化,導(dǎo)致反射光強(qiáng)度出現(xiàn)變化。通過分析反射光強(qiáng)度與入射角之間的關(guān)系,可以獲得分子結(jié)合的速率常數(shù)(kon)、解離速率常數(shù)(koff)等重要參數(shù),從而評估分子間的相互作用強(qiáng)度、親和力等。
SPR分子互作儀的應(yīng)用領(lǐng)域:
1.生物分子互作研究
能夠?qū)崟r、無標(biāo)記地檢測生物分子之間的相互作用。研究人員可以通過SPR技術(shù)監(jiān)測抗體與抗原、酶與底物、受體與配體等分子之間的親和力和動力學(xué)參數(shù)。例如,藥物篩選中,可以使用SPR技術(shù)研究小分子藥物與目標(biāo)蛋白的結(jié)合特性。
2.藥物發(fā)現(xiàn)與開發(fā)
在藥物開發(fā)過程中,能夠幫助研究人員評估候選藥物分子與靶標(biāo)蛋白的結(jié)合親和力,進(jìn)而篩選出具潛力的藥物分子。此外,SPR還可以用于監(jiān)測藥物的代謝過程,研究藥物在體內(nèi)的動態(tài)變化。
3.免疫學(xué)研究
SPR技術(shù)可以用于研究免疫分子(如抗體、抗原)之間的結(jié)合與解離過程,為疫苗研發(fā)、免疫檢測提供重要數(shù)據(jù)。通過SPR技術(shù),研究人員能夠量化免疫分子的親和力,評估免疫反應(yīng)的強(qiáng)度。
4.環(huán)境監(jiān)測與食品安全
還可用于檢測水質(zhì)、空氣質(zhì)量等環(huán)境因素中的有害物質(zhì)。通過特定的生物傳感器,SPR技術(shù)能夠快速、準(zhǔn)確地檢測污染物。此外,SPR技術(shù)也可用于食品安全檢測,如檢測食品中的致病菌或有毒物質(zhì)。
5.臨床檢測
在臨床醫(yī)學(xué)中,可用于生物標(biāo)志物的檢測,如早期癌癥診斷中的腫瘤標(biāo)志物分析。SPR技術(shù)的高靈敏度使其能夠在低濃度的生物分子檢測中發(fā)揮重要作用。