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LbCas12a屬于2類V型CRISPR效應蛋白,是一種依賴crRNA介導的核酸內切酶,在靶標雙鏈DNA存在PAM(TTN)序列的情況下,由crRNA介導特異性識別并切割雙鏈DNA.
詳細介紹
LbCas12a(又名Cpf)核酸酶來源于Lachnospiraceae bacterium ND2006 菌株。LbCas12a屬于2類V型CRISPR效應蛋白,是一種依賴crRNA介導的核酸內切酶,在靶標雙鏈DNA存在PAM(TTN)序列的情況下,由crRNA介導特異性識別并切割雙鏈DNA,而LbCas12a 特異性切割靶標單鏈DNA不依賴PAM序列。同時,LbCas12a-crRNA復合物與互補單鏈DNA或者雙鏈DNA結合后,其非特異性ssDNA反式切割活性被激活,通過設計兩端標記熒光基團或其它小分子標記的單鏈Reporter DNA,可實現(xiàn)Cas12a對DNA模板的檢測和信號放大。可通過熒光儀和試紙條觀察結果。LbCas12a屬于2類V型CRISPR效應蛋白,是一種依賴crRNA介導的核酸內切酶,在靶標雙鏈DNA存在PAM(TTN)序列的情況下,由crRNA介導特異性識別并切割雙鏈DNA.