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此文詳細(xì)講述了倒置熒光顯微鏡的應(yīng)用原理

閱讀:948        發(fā)布時(shí)間:2023-10-26
  倒置顯微鏡是為了適應(yīng)生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域中的組織培養(yǎng)、細(xì)胞離體培養(yǎng)、浮游生物、環(huán)境保護(hù)、食品檢驗(yàn)等顯微觀察。由于這些活體被檢物體均放置在培養(yǎng)皿(或培養(yǎng)瓶)中,這樣就要求倒置顯微鏡的物鏡和聚光鏡的工作距離很長(zhǎng),能直接對(duì)培養(yǎng)皿中的被檢物體進(jìn)行顯微觀察和研究。因此,物鏡、聚光鏡和光源的位置都顛倒過(guò)來(lái),故稱為“倒置顯微鏡”。
 
  倒置熒光顯微鏡,是指與一般顯微鏡相比,其物鏡、聚光鏡和光源的位置都顛倒過(guò)來(lái),由熒光附件與顯微鏡有機(jī)結(jié)合構(gòu)成的顯微鏡。激發(fā)光從物鏡向上落射到標(biāo)本表面,被反射到物鏡中并聚集在樣品上,樣品所產(chǎn)生的熒光以及由物鏡透鏡表面、蓋玻片表面反射的激發(fā)光同時(shí)進(jìn)入物鏡,經(jīng)雙色束分離器使激發(fā)光和熒光分開(kāi)而成像。物鏡和聚光鏡的工作距離很長(zhǎng),能直接對(duì)培養(yǎng)皿中的被檢物體進(jìn)行顯微觀察和研究。適用于土壤微生物培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),具有在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)進(jìn)行顯微觀察的特點(diǎn),可以觀察不經(jīng)染色的透明活體。特別適用于對(duì)活體細(xì)胞和細(xì)胞離體培養(yǎng)等顯微觀察。
 
  倒置熒光顯微鏡是激發(fā)光從物鏡向下落射到標(biāo)本表面,即用同一物鏡作為照明聚光器和收集熒光的物鏡。光路中需加上一個(gè)雙色束分離器,它與光軸呈45°角,激發(fā)光被反射到物鏡中,并聚集在樣品上,樣品所產(chǎn)生的熒光以及由物鏡透鏡表面、蓋玻片表面反射的激發(fā)光同時(shí)進(jìn)入物鏡,反回到雙色束分離器,使激發(fā)光和熒光分開(kāi),殘余激發(fā)光再被阻斷濾片吸收。如換用不同的激發(fā)濾片/雙色束分離器/阻斷濾片的組合插塊,可滿足不同熒光反應(yīng)產(chǎn)物的需要。此種熒光顯微鏡的優(yōu)點(diǎn)是視野照明均勻,成像清晰,放大倍數(shù)愈大熒光愈強(qiáng)。
 
  倒置熒光顯微鏡適用于對(duì)活體細(xì)胞和組織、流質(zhì)、沉淀物等進(jìn)行顯微研究,是生物學(xué),細(xì)胞學(xué),腫瘤學(xué),遺傳學(xué),免疫學(xué)等研究工作的**儀器。可供科研、高校、醫(yī)療、防疫和農(nóng)牧等部門使用。倒置熒光顯微鏡是由倒置顯微鏡和落射熒光顯微鏡組成。儀器配有長(zhǎng)工作距離平場(chǎng)消色差物鏡、大視野目鏡、雙目觀察,倒置顯微鏡還配有特長(zhǎng)或超長(zhǎng)工作距離聚光鏡,同時(shí)配有相襯裝置及長(zhǎng)工作距離平場(chǎng)相襯物鏡。

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