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冷凍電鏡是什么

閱讀:1430      發(fā)布時間:2024-4-29
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冷凍電鏡應(yīng)用場景:
晶體結(jié)構(gòu)解析。
絕對構(gòu)型判定。
鹽與共晶區(qū)分。
混合物組分結(jié)構(gòu)測定。
同分異構(gòu)確定。
冷凍電子顯微鏡技術(shù)簡稱冷凍電鏡:應(yīng)用冷凍固定技術(shù),低溫下使用投射電子顯微鏡觀察樣品的顯微技術(shù),從而得到生物大分子的結(jié)構(gòu)。
電鏡觀察:樣品經(jīng)過超低溫冷凍、斷裂、鍍膜制樣(噴金/噴碳)等處理后,通過冷凍傳輸系統(tǒng)放入電鏡內(nèi)的冷臺即可進行觀察。其中,快速冷凍技術(shù)可使水在低溫狀態(tài)下呈玻璃態(tài),減少冰晶的產(chǎn)生,從而不影響樣品本身結(jié)構(gòu),冷凍傳輸系統(tǒng)保證在低溫狀態(tài)下對樣品進行電鏡觀察。
1968年,AronKlug發(fā)現(xiàn)中心截面定理,提出可以通過三維物體不同角度的二維投影在計算機內(nèi)進行三維重構(gòu)來解析獲得物體的三維結(jié)構(gòu)。根據(jù)這一原理,利用透射電鏡獲得生物樣品多個角度的放大電子顯微圖像,即有可能在計算機里重構(gòu)出它的三維空間結(jié)構(gòu)。在冷凍電子顯微學(xué)結(jié)構(gòu)解析的具體實踐中,依據(jù)不同生物樣品的性質(zhì)及特點,可以采取不同的顯微鏡成像及三維重構(gòu)方法。
目前主要使用的幾種冷凍電子顯微學(xué)結(jié)構(gòu)解析方法包括:電子晶體學(xué)、單顆粒重構(gòu)技術(shù)、電子斷層掃描重構(gòu)技術(shù)等,它們分別針對不同的生物大分子復(fù)合體及亞細胞結(jié)構(gòu)進行解析。

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