一、色譜柱再生：恢復(fù)分離效能的關(guān)鍵步驟
凝膠色譜柱長(zhǎng)期使用后，可能因樣品殘留或微生物污染導(dǎo)致柱效下降。再生流程需根據(jù)污染物類(lèi)型選擇方法：
有機(jī)物污染：用純甲醇或乙腈以0.5mL/min流速?zèng)_洗2-4小時(shí)，置換凝膠孔隙中的疏水雜質(zhì)。
鹽沉積或蛋白質(zhì)污染：采用階梯式?jīng)_洗法，先用50%乙腈+0.1%TFA）沖洗1小時(shí)，再換用0.1MNaOH溶液沖洗2小時(shí)（需確認(rèn)色譜柱耐受pH），最后用純水平衡至中性。
再生后驗(yàn)證：注射標(biāo)準(zhǔn)樣品（如聚乙二醇或藍(lán)葡聚糖），對(duì)比再生前后保留時(shí)間與峰形，若理論塔板數(shù)恢復(fù)至初始值的80%以上，則再生成功。
二、泵密封更換：保障流速穩(wěn)定的核心操作
泵密封磨損會(huì)導(dǎo)致漏液或壓力波動(dòng)，需定期更換：
更換時(shí)機(jī)：若發(fā)現(xiàn)泵頭有液體滲出、壓力不穩(wěn)定或流速誤差超過(guò)±2%，需立即更換密封圈。
操作步驟：關(guān)閉儀器電源，排空系統(tǒng)壓力；拆卸泵頭，取出舊密封圈（注意方向）；用異丙醇清潔密封槽，安裝新密封圈并涂抹硅脂潤(rùn)滑；重新組裝后，用純水以0.1mL/min流速排氣泡，逐步升至目標(biāo)流速。
注意事項(xiàng)：避免使用尖銳工具觸碰密封圈，防止劃傷；更換后需運(yùn)行至少30分鐘，觀(guān)察壓力是否穩(wěn)定。
三、基線(xiàn)校準(zhǔn)：確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的基礎(chǔ)
基線(xiàn)漂移或噪聲過(guò)高會(huì)影響定量結(jié)果，需定期校準(zhǔn)：
校準(zhǔn)前準(zhǔn)備：用純流動(dòng)相沖洗系統(tǒng)至基線(xiàn)穩(wěn)定（通常需2-4小時(shí)），確保檢測(cè)器池溫度與柱溫一致。
校準(zhǔn)方法：進(jìn)入儀器軟件“基線(xiàn)校準(zhǔn)”模塊，采集空白溶劑信號(hào)，自動(dòng)扣除背景噪聲；若手動(dòng)校準(zhǔn)，需記錄基線(xiàn)偏移值，在數(shù)據(jù)分析時(shí)修正。
維護(hù)建議：每月檢查一次基線(xiàn)穩(wěn)定性，若噪聲＞0.5mAU（UV檢測(cè)器）或漂移＞0.1mAU/min，需清洗檢測(cè)器流通池或更換氘燈。
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