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當前位置:上海語純生物科技有限公司>>細胞系>> 50T/48S淀粉含量檢測試劑盒
供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 50T/48S |
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應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè),制藥/生物制藥 |
淀粉含量檢測試劑盒
注意:正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定。
試劑一:液體 50mL×1 瓶,4℃保存; 試劑二:液體 20mL×1 瓶,4℃保存; 試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存;
標準品:粉劑×10mg支,4℃保存;臨用前加入 1mL 蒸餾水溶解,制備 10mg/mL 葡萄糖標準液。
淀粉是植物中糖的主要儲存形式,其含量測定對于評價食品營養(yǎng)價值和調查植物體內糖代謝都有重要意義。
利用 80%乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開,進一步采用酸水解法分解淀粉為葡萄糖,采用蒽酮比色法測定葡萄糖含量,即可計算淀粉含量。
可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、玻璃比色皿、研缽、冰、濃硫酸(不允許快遞)、蒸餾水。
一、淀粉提?。?/span>
1、稱取約 0.1g 樣品于研缽中研碎,加入 1mL 試劑一,充分勻漿后轉移到 EP 管中,80℃水浴提取
30min,3000g,常溫離心 5min,棄上清,留沉淀。
2、沉淀中加入 0.5mL 雙蒸水,放入沸水浴中糊化 15min(蓋緊,以防止水分散失)。
3、冷卻后,加入 0.35mL 試劑二,常溫提取 15min,振蕩 3-5 次。
4、加入 0.85mL 雙蒸水,混勻,3000g,常溫離心 10min,取上清液。
5、取上清液 100μL 加入 700μL 蒸餾水后即進行了八倍稀釋測定。注:若稀釋八倍后樣品吸光度大于 1.5 或小于 0.1,建議將樣品再進行適當稀釋或濃縮后測量。
將 10mg/mL 葡萄糖標準液進行二倍稀釋得到 0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0.00156mg/mL 標準溶液備用。
1、分光光度計預熱 30min 以上,調節(jié)波長至 620nm,蒸餾水調零。
2、調節(jié)水浴鍋至 95℃。
3、工作液的配制:臨用前在試劑三中加入 13.5mL 蒸餾水后,緩慢加入 76.5mL 濃硫酸,不斷攪拌, 充分溶解,待用。
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4、標準品測定:取 0.2mL 標準溶液(蒸餾水做空白)和 1mL 工作液至 EP 管中,95℃水浴 10 min
(蓋緊,防止水分散失),自然冷卻至室溫,在 620 nm 波長下測定吸光度值 A 標準及 A 空白。計算ΔA=A 標準-A 空白。
5、樣本測定:取0.2mL樣本和1mL工作液至EP管中,95℃水浴10 min(蓋緊,防止水分散失),自然冷卻至室溫,在620 nm 波長下測定吸光度值A測定。ΔA′=A測定- A空白。
1、標準曲線繪制:
以 0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0.00156mg/mL 葡萄糖標準溶液為橫坐標,ΔA 為縱坐標繪制標準曲線,得到線性回歸方程 y=kx+b,將ΔA′代入方程得到 x(mg/mL); 2、淀粉含量計算:
(1)、按照蛋白濃度計算
淀粉含量(mg/mg prot)=x×稀釋倍數×V 提取÷(Cpr×V 提?。?/span>=8x÷Cpr 2、按樣本鮮重計算
淀粉含量(mg/g 鮮重)=x×稀釋倍數×V 提取÷W=13.6x÷W
V 提取:提取后體積,1.7 mL;Cpr:樣本提取后蛋白質濃度,mg/mL;W:樣品質量,g;稀釋倍數:8。
注意事項:由于工作液具有強腐蝕性,請謹慎操作。
上海語純生物科技有限公司,是由具有*生命科學、生物技術背景人員共同創(chuàng)辦的技術企業(yè)。公司專注于原代細胞、腫瘤細胞及細胞培養(yǎng)相關試劑產品,為高校、食品、醫(yī)藥、生物研究等領域提供相關技術支持和服務。
公司自成立以來通過不斷地科技創(chuàng)新,產品研發(fā),已為客戶提供定制化細胞產品以及完整的細胞培養(yǎng)解決方案,通過積極地探索、研發(fā)、深化和豐富產品,目前基礎培養(yǎng)基產品種類多達200多種,細胞系300多種,原代細胞接近600種。我們始終以“發(fā)展科學技術,關愛公眾生命健康"為動力,通過技術創(chuàng)新,廣泛吸納高科技人才,不斷完善產品體系、豐富產品鏈,積極拓展市場,擴充應用領域,,建立了具有市場競爭力的“語純"品牌。
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3、本產品僅供科學研究或進一步生產使用,不可用于臨床診斷或治療。
淀粉含量檢測試劑盒
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