土壤多酚氧化酶（Solid-Polyphenol oxidase，S-PPO）試劑盒說明書

分光光度法 50 管/48 樣

土壤多酚氧化酶試劑盒

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

S-PPO 主要來源于土壤微生物、植物根系分泌物及動植物殘體分解釋放，催化土壤中芳香族化合物氧化成醌，醌與土壤中蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類、礦物等物質(zhì)反應生成有機質(zhì)和色素，完成土壤芳香族化合物循環(huán)，用于土壤環(huán)境修復。

測定原理：

S-PPO 能夠催化鄰苯三酚產(chǎn)生有色物質(zhì)，后者在 430nm 有特征光吸收。

試劑組成和配制：

試劑一：粉劑×2 瓶，4℃保存；臨用前取一瓶，加入 15ml 蒸餾水充分溶解后待用；用不完的試劑 4℃保存一周。

需自備儀器和用品：

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml 玻璃比色皿、yi醚 100ml（不允許快遞）、蒸餾水。

樣品處理：

新鮮土樣自然風干或 37 度烘箱風干，過 30~50 目篩。

測定步驟：

振蕩數(shù)次，室溫靜置 30min，用蒸餾水調(diào)零，取 1ml 上層液于 430nm 處測定吸光值A。

注意事項:

1、因yi醚粘度小，易掉液，吸取前需先將槍頭在上層液里潤洗 2~3 次，再轉(zhuǎn)移測定；

2、yi醚易揮發(fā)，轉(zhuǎn)移到比色皿后立即測定，最好一個一個測定）。

S-PPO 活力計算：

標準條件下測定的回歸方程為y = 8.97x -0.003；x 為標準品濃度（mg/ml），y 為吸光值A。單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1mg 紫色沒食子素定義為一個酶活力單位。

S-PPO 活力（mg/d /g 土樣）＝(A+0.003) ÷8.97×V 反總÷W÷T=131×(A+0.003)

T：反應時間，1h=1/24d； V 反總：反應體系總體積 2.45ml；W：樣本質(zhì)量，0.05g。

土壤多酚氧化酶試劑盒