低溫保存、冷凍干燥對(duì)程序降溫的要求

低溫一般是指0℃左右，深低溫一般指低于-80℃以下，在低溫環(huán)境中，生物體的新陳代謝會(huì)隨著溫度的降低而延緩。在0℃以上時(shí)，這種延緩是可逆的，隨著溫度升高，新陳代謝還回逐步恢復(fù)，但降至0℃以下時(shí)，這種延緩會(huì)受到不可逆的損傷。因?yàn)樾玛惔x一般發(fā)生在水溶液或和水溶液之上進(jìn)行，而冰點(diǎn)以下的水會(huì)形成硬度較高的冰晶，并且會(huì)使細(xì)胞內(nèi)的水分丟失而形成細(xì)胞脫水。

所以不同的細(xì)胞要求利用不同的降溫程序，一些復(fù)雜的細(xì)胞還需要多段降溫。降溫方法多樣，例如利用冰箱進(jìn)行兩步法降溫，和利用液氮容器內(nèi)氣象區(qū)的溫度梯度手控降溫。

在設(shè)計(jì)和選用降溫儀時(shí)需要全面考慮到產(chǎn)品需求，例如數(shù)量、形狀等，同時(shí)需要考慮降溫儀的降溫速率、溫控范圍等，另外還要考慮到經(jīng)濟(jì)性和實(shí)用性，綜合評(píng)價(jià)下選用方案。

（1）工作溫度范圍：一般情況下降溫儀的溫控范圍是室溫至-60℃，溫度則根據(jù)實(shí)際工作需要決定。

（2）溫控速率：經(jīng)過(guò)數(shù)十年的反復(fù)研究，學(xué)者們發(fā)現(xiàn)越低的降溫速率越能實(shí)現(xiàn)對(duì)于復(fù)雜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞降溫需求，而所謂的“超慢速冷卻”則需要降溫儀能夠達(dá)到0.001℃/min的速度。另外個(gè)別需要急速冷凍的工作需要，則可以直接選擇液氮冷凍的方式進(jìn)行。

（3）控制精度：降溫過(guò)程中的控制精度包括兩個(gè)方面：降溫速率的精度控制和溫度值的精度控制。實(shí)踐中認(rèn)為誤差在5%之內(nèi)是可以被接受的。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)，一般控制在±0.2℃的精度控制內(nèi)是可以被允許的。

（4）冷源的選擇：在實(shí)際工作中，一般情況下使用價(jià)格較低的固態(tài)二氧化碳和液氮用來(lái)作為冷源。當(dāng)華點(diǎn)高于-78℃時(shí)，一般選用固態(tài)二氧化碳，而需要更低溫度時(shí)則選用液氮，目前大多數(shù)降溫儀選用的冷源是液氮。