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22Rv1 人前列腺癌細胞操作指南

來源:上海哈靈生物科技有限公司   2019年05月29日 15:16  

 

22Rv1   人前列腺癌細胞

Cat NO.: CL-0004

 

General Information:

Organism: Homo sapiens, human

Tissue: prostate

Culture Properties: adherent

Morphology: epithelial

 

Culture Method:

Complete Growth Medium: RPMI-1640(Gibco31800-022)+10%FBS+ Penicillin/Streptomycin

Subculturing: Volumes are given for a 25cm2 flask. Increase or decrease the amount of dissociation medium needed proportionally for culture vessels of other sizes.

1.Remove and discard culture medium.

2.Briefly rinse the cell layer with 0.25%(w/v) Trypsin-EDTA solution to remove all traces of serum that contains trypsin inhibitor.

3.Add 1.0 to 2.0mL of Trypsin-EDTA solution to flask and observe cells under an inverted microscope until cell layer is dispersed. Discard Trypsin-EDTA solution.

4.Add 6.0 to 8.0mL of complete growth medium and aspirate cells by gently pipetting.

5.Add appropriate aliquots of the cell suspension to new culture vessels.

6.Incubate cultures at 37°C, 5% CO2.

Subc*tion Ratio: A subc*tion ratio of 1:3 to 1:6 is recommended

Cryopreservation: Freeze medium: Complete growth medium supplemented with 10% (v/v) DMSO

Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

 

注意事項:

1.收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)絡。

2.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。

3.用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)4~6小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)絡,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4.靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出,留6~8mL維持細胞正常培養(yǎng),待細胞匯合度80%左右時正常傳代。

5.請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。

6.建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和Procell技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)絡,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7.該細胞只可用于科研。

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