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技術(shù)服務(wù) 配體模擬激活性抗體制備

來源:安諾倫(北京)生物科技有限公司   2020年05月09日 10:07  

技術(shù)簡介

細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)是細(xì)胞功能組學(xué)研究的核心內(nèi)容。而受體配體結(jié)合啟動細(xì)胞信號活動是許多激活或抑制性信號通路關(guān)鍵的起始步驟。通過制備細(xì)胞表面信號受體的相關(guān)抗體,然后用抗體模擬受體的原配體細(xì)胞表面受體結(jié)合,從而啟動細(xì)胞信號通路,這樣的抗體我們稱之為配體模擬激活性抗體。這其中經(jīng)典的例子莫過于一些在腫瘤靶向治療中使用的抗體藥物,目前,臨床上至少有11種單克隆抗體藥物被認(rèn)定為是以受體激活方式發(fā)揮功能的。

目前除了常規(guī)的兔、鼠多抗和鼠單抗雜交瘤細(xì)胞制備篩選方案,基于噬菌體展示技術(shù),本公司目前還能夠?qū)崿F(xiàn)對新的受體激活抗體的發(fā)現(xiàn),我們有常備的天然抗體庫,也可以根據(jù)特定抗原的信息,依托*的原核或真核蛋白表達(dá)技術(shù),制備免疫后噬菌體庫,然后針對受體重組胞外區(qū)(ECD)進(jìn)行特異性抗體篩選。經(jīng)過噬菌體ELISA初篩的到的單鏈抗體,還可以進(jìn)一步進(jìn)行一些基于細(xì)胞實驗的功能性篩選。公司目前已分離得到包括TNF受體超家族、CD28、CD40、PD1、CD137等在內(nèi)的配體模擬型激活性抗體。

服務(wù)組合

 

服務(wù)項目

(Service Items)

周期(周)

Time(weeks)

免疫庫

immunized   library

天然庫

naive library

雜交瘤制備篩選

Hybridoma   Screening

多肽設(shè)計與合成

Peptide design   & synthesis

多肽設(shè)計

Peptide design

~2

可選,免費(fèi)

多肽合成

Peptide   synthesis

  

 

小分子或多肽偶聯(lián)

conjugation

  

 

蛋白制備

Proteins   preparation

cDNA合成

cDNA synthesis

6~8

 

  

另議,時間與價格均不包含在以下信息中

載體構(gòu)建

Vector   construction

 

  

蛋白表達(dá)與純化

Protein   expression & purification

 

  

免疫階段

Immunization

免疫動物

Immunized   animals

~8

 

ELISA檢測

Elisa detection

 

細(xì)胞融合與篩選

Fusion &   Screening

1.5

  

亞克隆階段

Subcloning

1

  

腹水生產(chǎn)(2只大鼠)

Ascites   production (Injection on 2 mice)

1

  

cDNA制備

cDNA preparation

逆轉(zhuǎn)錄制備cDNA文庫

prepare cDNA   library by RT-PCR

~1

  

cDNA 文庫質(zhì)檢

cDNA library QC   check

  

構(gòu)建Fab抗體庫

Fab library   construction

VH與VL基因獲得

obtained VH   and VL genes

10~15

  

構(gòu)建初級抗體庫

primary antibody   library construction

  

構(gòu)建Fab抗體庫

Fab library   construction

  

噬菌體篩選

phage screening

噬菌體顆粒包裝

phage particles   package

10~15

 

磁珠親和篩選

magnetic beads   affinity screening

 

陽性克隆回收基因測序

Recover positive   clones and DNA sequencing

 

抗體表達(dá)

Antibody   expression

特異性雙鏈基因合成與Fc基因橋接

synthetic of   target phage gene and Fc gene

~5

 

構(gòu)建真核表達(dá)載體

Eukaryotic   system expression plasmids construction

 

真核表達(dá)

Eukaryotic   system expression

 

穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系構(gòu)建

Stably   transfected cell line construction

   

純化與檢測

Purification and   detection

標(biāo)簽純化

Tag affinity   purification

~1

 

親和純化

Affinity   purification

  

特異性親和純化

Antigen specific   affinity purification

 

總周期(月)

Total lead   time(months)

7~9

注:

價格面議;

請慎重考慮周期事宜,以上時間僅為理想條件下短周期;

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