本文由中國藥科大學(xué)天然藥物國家重點(diǎn)實驗室藥物代謝與藥代動力學(xué)重點(diǎn)實驗室所作，發(fā)表于Bioanalysis (2015) 7(7), 885–894。

目的：建立生物樣品中治療性肽的定量分析方法。材料與方法:以奧曲肽為模型治療肽，合成氧化奧曲肽作為內(nèi)標(biāo)。采用蛋白沉淀結(jié)合液-液萃取技術(shù)，有效提高了回收率，減少了內(nèi)源性干擾。根據(jù)FDA指南，對血漿中奧曲肽的LC-MS/MS定量方法進(jìn)行了優(yōu)化和驗證。結(jié)果:線性、選擇性、準(zhǔn)確度、精密度、穩(wěn)定性、基質(zhì)效應(yīng)和回收率均符合FDA指南生物分析方法驗證驗收標(biāo)準(zhǔn)。該方法已成功地應(yīng)用于奧曲肽的研究。結(jié)論:該方法可用于奧曲肽和其他治療性肽的藥代動力學(xué)研究。

使用儀器：島津LCMS-8050

圖 大鼠血漿中一種奧曲肽樣品制備過程

圖 奧曲肽和氧化奧曲肽的代表性質(zhì)譜圖。(A)乙腈蛋白沉淀法制備的空白血漿;(B)蛋白沉淀結(jié)合液液萃取法制備的空白血漿;(C)加入奧曲肽(50.0 ng/ml)和內(nèi)標(biāo)的空白血漿;(D) 加入奧曲肽(0.5 ng/ml)和內(nèi)標(biāo)的空白血漿;(E)大鼠靜脈注射奧曲肽0.1 mg/kg后2h采集血漿。AQT: 奧曲肽; C-A: 氧化奧曲肽

圖 大鼠血漿中奧曲肽的校準(zhǔn)曲線，濃度范圍為0.5-500.0ng/ml

表 大鼠奧曲肽靜脈注射0.1 mg/kg和灌胃45 mg/kg后的主要藥代動力學(xué)參數(shù)

在臨床研究中，已經(jīng)發(fā)表了幾種用于奧曲肽定量的生物分析方法。然而，由于這些文獻(xiàn)在樣品處理技術(shù)、內(nèi)標(biāo)選擇和檢測方式等方面的差異，很難選擇一種穩(wěn)定的檢測方法。此外，就我們所知，對奧曲肽的臨床前藥代動力學(xué)特征知之甚少。

•開發(fā)的以氧化奧曲肽為內(nèi)標(biāo)的大鼠血漿中奧曲肽的LC-MS/MS定量方法已根據(jù)美國指南進(jìn)行了充分驗證。

•線性、準(zhǔn)確度、精密度、基質(zhì)效應(yīng)和回收率符合FDA指南中的生物分析方法驗證驗收標(biāo)準(zhǔn)。

•所建立的LC-MS/MS方法在大鼠血漿中表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。

•上述方法已成功應(yīng)用于奧曲肽的藥代動力學(xué)研究。

•目前奧曲肽在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究將為奧曲肽的開發(fā)和合理使用提供有益的信息。

•目前開發(fā)的方法只需稍加修飾，可以用于其他治療性肽類的藥代動力學(xué)研究。

文獻(xiàn)題目

《PK study of octreotide based on LC-MS/MS combining protein precipitation and impurity extraction technique》

使用儀器

島津LCMS-8050

作者

Qian Wang**,1, Yan Liang*,1,Tai Rao**,1, Lin Xie1. Wei Ye1, Hanxu Fu1, Liiun Zhou1,Rong Xing1,2, Yuhao Shao1,Jingcheng Xiao1, Dian Kang1&Guangji Wang1

1 Key Lab of Drug Metabolism&Pharmacokinetics, State Key Laboratory of Natural Medicines, China Pharmaceutical University, Tongjiaxiang 24, Nanjing 210009, China

2 Department of Pharmacy, the First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College, Bengbu, Anhui, 233004,China

* Author for correspondence

**Authors contributed equally