Seahorse XF 細(xì)胞線(xiàn)粒體壓力測(cè)試技術(shù)服務(wù)
Seahorse XF 細(xì)胞線(xiàn)粒體壓力測(cè)試
Seahorse XF 細(xì)胞線(xiàn)粒體壓力測(cè)試全面了解線(xiàn)粒體功能
1、實(shí)驗(yàn)背景
安捷倫 SeahorseXF 細(xì)胞線(xiàn)粒體壓力測(cè)試通過(guò)在 Seahorse XFe 和 XF 細(xì)胞外流量分析儀上直接測(cè)量細(xì)胞的氧消耗速率(OCR)來(lái)表征線(xiàn)粒體功能的關(guān)鍵參數(shù)。它是基于培養(yǎng)板的活細(xì)胞實(shí)驗(yàn),能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè) OCR。
實(shí)驗(yàn)使用 XF 傳感器探針板內(nèi)置的加藥孔在實(shí)驗(yàn)過(guò)中將呼吸作用的調(diào)節(jié)劑加入細(xì)胞孔中,從而得到反映線(xiàn)粒體功能的關(guān)鍵參數(shù)。實(shí)驗(yàn)試劑盒里的調(diào)節(jié)劑為寡霉素(Oligomycin),羰基氰-4(三氟甲氧基)苯腙(Carbonyl cyanide-4 (trifluoromethoxy)Phenylhydrazone,F(xiàn)CCP),魚(yú)藤酮(Rotenone)。
Seahorse XF 細(xì)胞線(xiàn)粒體壓力測(cè)試詞匯表:
基礎(chǔ)呼吸(Basal respiration):用來(lái)滿(mǎn)足細(xì)胞ATP需求和線(xiàn)粒體質(zhì)子滲漏的氧消耗。表示細(xì)胞在基礎(chǔ)條件下的能量需求。
ATP產(chǎn)生(ATP Production):加入ATP合酶抑制劑寡霉素后減少的氧氣消耗速率,代表基礎(chǔ)呼吸中被用來(lái)驅(qū)動(dòng)ATP產(chǎn)生的部分。表示用來(lái)滿(mǎn)足細(xì)胞能量需求的線(xiàn)粒體ATP產(chǎn)生。
H+(質(zhì)子)滲漏(H+ (Proton) leak):與 ATP產(chǎn)生不偶聯(lián)的基礎(chǔ)呼吸的剩余部分。質(zhì)子滲漏可以被看作是線(xiàn)粒體損傷的標(biāo)志,也可被看作是一種調(diào)節(jié)線(xiàn)粒體ATP產(chǎn)生的機(jī)制。
最大呼吸(Maximal respiration):加入解偶聯(lián)劑FCCP之后獲得的最大氧氣消耗速率。FCCP通過(guò)刺激呼吸鏈以最大能力運(yùn)轉(zhuǎn)模擬生理的“能量需求”,導(dǎo)致底物(糖,脂肪和氨基酸)的快速氧化以應(yīng)對(duì)這一代謝挑戰(zhàn)。顯示細(xì)胞能夠達(dá)到的最大呼吸速率。
備用呼吸能力(Spare respiratory capacity):這個(gè)測(cè)量指標(biāo)表示細(xì)胞應(yīng)對(duì)能量需求的能力以及細(xì)胞呼吸與其理論最大值的差距。細(xì)胞應(yīng)對(duì)能量需求的能力可作為細(xì)胞適應(yīng)性或靈活性的一個(gè)指標(biāo)。
非線(xiàn)粒體呼吸(Nonmitochondrial respiration):加入魚(yú)藤酮后,由于一部分細(xì)胞中的酶繼續(xù)消耗氧而存留的氧消耗。這對(duì)于線(xiàn)粒體呼吸的準(zhǔn)確測(cè)量很重要。
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