表1總結(jié)了這些化合物的作用效果。
表1線粒體呼吸調(diào)節(jié)劑作用靶點和效果總結(jié)
化合物 | ETC靶點 | 對OCR的影響 |
寡霉素 | ATP合酶(復(fù)合物V) | 減少 |
FCCP | 線粒體內(nèi)膜 | 增加 |
魚藤酮/kangmeisuA | 分別為復(fù)合物I和III | 減少 |
對線粒體功能進行評估使研究人員能夠進一步了解代謝在細胞生理學(xué),疾病病理學(xué)和病因?qū)W中的關(guān)鍵作用。
SeahorseXF細胞線粒體壓力測試是測量細胞線粒體功能的金標(biāo)準(zhǔn),被廣泛應(yīng)用。本實驗為了解線粒體功能障礙的原因和深入理解代謝途徑,信號和表型提供了視角。
詞匯表:
基礎(chǔ)呼吸(Basal respiration):用來滿足細胞ATP需求和線粒體質(zhì)子滲漏的氧消耗。表示細胞在基礎(chǔ)條件下的能量需求。
ATP產(chǎn)生(ATP Production):加入ATP合酶抑制劑寡霉素后減少的氧氣消耗速率,代表基礎(chǔ)呼吸中被用來驅(qū)動ATP產(chǎn)生的部分。表示用來滿足細胞能量需求的線粒體ATP產(chǎn)生。
H+(質(zhì)子)滲漏(H+ (Proton) leak):與 ATP產(chǎn)生不偶聯(lián)的基礎(chǔ)呼吸的剩余部分。質(zhì)子滲漏可以被看作是線粒體損傷的標(biāo)志,也可被看作是一種調(diào)節(jié)線粒體ATP產(chǎn)生的機制。
最大呼吸(Maximal respiration):加入解偶聯(lián)劑FCCP之后獲得的最大氧氣消耗速率。FCCP通過刺激呼吸鏈以最大能力運轉(zhuǎn)模擬生理的“能量需求”,導(dǎo)致底物(糖,脂肪和氨基酸)的快速氧化以應(yīng)對這一代謝挑戰(zhàn)。顯示細胞能夠達到的最大呼吸速率。
備用呼吸能力(Spare respiratory capacity):這個測量指標(biāo)表示細胞應(yīng)對能量需求的能力以及細胞呼吸與其理論最大值的差距。細胞應(yīng)對能量需求的能力可作為細胞適應(yīng)性或靈活性的一個指標(biāo)。
非線粒體呼吸(Nonmitochondrial respiration):加入魚藤酮和xxxA后,由于一部分細胞中的酶繼續(xù)消耗氧而存留的氧消耗。這對于線粒體呼吸的準(zhǔn)確測量很重要。
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