細(xì)胞培養(yǎng)問題集錦第十七期，小編會繼續(xù)收集相關(guān)問題，每期都為大家更新5個細(xì)胞培養(yǎng)中遇到的問題并解答~

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▲問：hepg2細(xì)胞有很多小球聚集到一起，這是污染還是沒有吹開的細(xì)胞？是不是念珠菌感染？出不來形態(tài)，吹不勻。

答：肝癌就是這樣，很容易坨，肝癌會有一個聚集成團(tuán)，一片一片的clone，也會成聚集，推薦是帶丙酮酸鈉的MEM。

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問：細(xì)胞培養(yǎng)中加入biotin有什么作用呢？

答：是為了促進(jìn)細(xì)胞增殖。

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▲問：細(xì)胞轉(zhuǎn)了敲低基因的病毒之后，為什么總會出現(xiàn)一些比細(xì)胞還要亮的，碎片樣的東西，或者圓形的東西呢？

答：基因的表達(dá)包括 GFP用，都會用泊松分布Poisson distribution的形式出現(xiàn)， 有些細(xì)胞有多一點GFP的表達(dá), 有些少的。圓形的細(xì)胞是因為基因蛋白表達(dá)較高 ，所以熒光蛋白表達(dá)都高。

▲問：這種很亮的碎片呢？感覺他不像是細(xì)胞的樣子！

答：細(xì)胞開始細(xì)胞凋亡，可能是凋亡小體，可用DAPI。

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問：細(xì)胞剛復(fù)蘇都是亮亮的圓點是什么原因？之前復(fù)蘇長得很快。

答：是不是還沒貼壁？

問：之前兩天都長滿貼壁了，這次也兩天了只有一點細(xì)胞貼壁。

答：復(fù)蘇率不高，是不是沒凍好？

問：之前別人凍的，需要重新復(fù)蘇嗎？

答：如果培養(yǎng)基和血清養(yǎng)別的沒問題，那不太可能是營養(yǎng)體系問題。可能是凍存環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，傳代后不會有好轉(zhuǎn)，看看細(xì)胞能增殖出來不，增殖不出來就需要重新復(fù)蘇了。

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▲問：請問上面三個圖里，細(xì)胞是染菌了嗎？昨天給單獨加了100ul過濾的bi血清。

答：從照片上看黑點的形態(tài)高倍數(shù)放大是球菌，低倍數(shù)放大它們是立體聚集在一起，疑似是葡萄球菌。平面聚集的是鏈球菌。

問：黑點是不會動的，用三抗可以嗎，還有救嗎？

答：細(xì)胞還有庫存的話建議重新復(fù)蘇，因為細(xì)胞感染了，去除要花多些時間。

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